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研究生:鄒潤豪
研究生(外文):Tsou, Ruen Hao
論文名稱:瑞香狼毒萃取物之蔬菜作物蟲害防治
論文名稱(外文):Pest Control of Vegetable Crops with Stellera Chamaejasme Extract
指導教授:楊博文楊博文引用關係
指導教授(外文):Yang, Powen
口試委員:陳信泰尤耿賢
口試委員(外文):Chen, HsintaiYou,Genshian
口試日期:2012-07-06
學位類別:碩士
校院名稱:大葉大學
系所名稱:生物產業科技學系
學門:生命科學學門
學類:生物科技學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2012
畢業學年度:100
語文別:中文
論文頁數:92
中文關鍵詞:瑞香狼毒熱迴流萃取總黃酮蟲害防治
外文關鍵詞:Stellera chamaejasme L.Heating reflux extractiontotal flavonoidsPest control
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中文摘要

瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)為瑞香科狼毒屬植物,是一種需要防除的草地有毒植物,民間傳統中被用來治水腫腹脹、痰、止痛,但因為毒性大並不常用,也常被用於驅蟲、殺蠅等。
本研究利用不同醇類溶劑(甲醇、乙醇、異丙醇、水)熱迴流萃取瑞香狼毒,對其萃取液進行總黃酮的含量測定,以分光光度計作定量分析;後續再對瑞香狼毒萃取液進行蔬菜作物的蟲害防治盆栽試驗;取蔬菜作物蟲害防治效果最適的萃取溶劑,以熱迴流萃取法對總黃酮,進行時間、溫度、固液比的單因子試驗,而在最佳萃取條件的研究上,將以直交試驗設計法(田口氏試驗法;Orthogonal Array),探討在不同時間、溫度、固液比等條件下對總黃酮含量的影響。
蔬菜作物的蟲害防治盆栽試驗結果顯示,醇溶劑萃取的萃取液,具有比溶劑對照組還要好的防治蟲害效果,效果最適是純異丙醇萃取液,而水萃取液與溶劑對照組的蟲害防治效果為相似。
熱迴流萃取最佳條件為:以純異丙醇為最佳萃取溶劑,萃取時間7小時、萃取溫度70℃、萃取固液比1:25,即可得到產率0.28%總黃酮。

關鍵字:瑞香狼毒、熱迴流萃取、總黃酮、蟲害防治

ABSTRACT

Stellera chamaejasme L. was a genus of Thymelaeaceae Stelleralinn Plant., and it was one poisonous plant that be stamped on the meadow. Stellera chamaejasme L. was used for the treatment of edema, sputum, relieve pain, anti-Pest control, but it was one poisonous plant to be used rarely.
In this study, Stellera chamaejasme L. was extracted with different alcohols solvent by heating reflux extraction. The content of total flavonoids were analyzed, and we used the spectrophotometer for quantitative analysis. On the pest control of vegetable crops with stellera chamaejasme L. extract, we studied optimal extraction solvent for the effect of pest control. We extracted total flavonoids by heating reflux extraction. Using single-factor experiments, as well as the Taguchi's orthogonal array, we studied the optimal extraction conditions, including solvent, time, temperature, and ratio of raw-material-to-solvent.
In results of the vegetable crops pest control pot experiment, alcohols solvents were extracted to Stellera chamaejasme L., and the pest control effect was better than the control groups to alcohols solvents. The best pest control effect was the extract by isopropanol.The water extracts and the solvent control groups were the same to the pest control effect.
The highest total flavonoids yields with heating reflux extraction was 0.28% with extraction conditions of 70℃, 7 hr, and a raw-material-to-solvent ratio of 1:25.

Key Words : Stellera chamaejasme L., Heating reflux extraction, total flavonoids, Pest control

目錄

封面內頁
簽名頁
中文摘要 iii
英文摘要 iv
誌謝 v
目錄 vi
圖目錄 x
表目錄 xiv

1. 前言1
2. 文獻回顧3
2.1 瑞香狼毒簡介3
2.1.1 瑞香狼毒型態及分佈簡介 3
2.1.2 瑞香狼毒成分及研究概況 5
2.1.3 瑞香狼毒活性成分簡介7
2.1.3.1 類黃酮化合物7
2.1.3.2 狼毒素10
2.1.3.3 香豆素11
2.2 傳統萃取方法簡介13
2.2.1 冷浸攪拌萃取 13
2.2.2 索式萃取法13
2.2.3 溶劑熱迴流萃取14
2.2.4 熱迴流萃取應用於中藥植物萃取的前景14
2.3 植物農藥與十字花科蔬菜及蟲害介紹15
2.3.1 植物農藥15
2.3.2 供試值物之介紹15
2.3.2.1 包心白菜15
2.3.2.2 甘藍16
2.3.3 常見十字花科蔬菜害蟲之介紹17
2.3.3.1 小菜蛾17
2.3.3.2 大菜螟17
2.3.3.3 菜心螟17
2.3.3.4 紋白蝶17
2.3.3.5 菜潛蠅18
2.3.4 化學農藥對照組之介紹18
2.3.4.1 百滅寧18
2.4 直交試驗計劃法19
2.4.1 直交試驗計劃法簡介19
2.4.2 直交表之符號意義19
2.4.3 信號雜信比20
3. 材料與方法22
3.1 材料22
3.1.1 植物來源22
3.1.2 藥品清單22
3.1.3 實驗儀器與設備清單22
3.1.4 盆栽防治試驗材料清單23
3.2 試驗方法24
3.2.1 樣品前處理24
3.2.2 水份含量測定方式24
3.2.3 不同萃取溶劑萃取試驗的建立25
3.2.3.1熱迴流萃取單一因子探討 25
3.2.3.2 熱迴流萃取之直交表探討 28
3.2.3.3 熱迴流萃取之最佳條件萃盡探討28
3.2.4 成分分析29
3.2.4.1 總黃酮含量分析29
3.2.4.2 總黃酮標準取線建立29
3.2.5 盆栽防治試驗方法29
3.2.5.1 供試蔬菜植株樣品的製備29
3.2.5.2 瑞香狼毒萃取液對蔬菜蟲害防治(第一階段)30
3.2.5.3瑞香狼毒萃取液對蔬菜蟲害防治(第二階段)31
3.2.5.4瑞香狼毒萃取液對蔬菜蟲害防治(第三階段)32
3.2.5.5 土壤介質的配製32
3.2.5.6 蔬菜盆株的製備32
3.2.5.7 防治處理方式33
3.2.5.8 試驗結果紀錄方式33
3.2.5.9 試驗結果分析方式33
3.2.5.10萃取液中總固形物測定方式34
3.2.6 試驗流程圖35
4. 結果與討論36
4.1 熱迴流萃取單一因子探討36
4.1.1 熱迴流萃取瑞香狼毒,不同萃取溶劑對總黃酮產量之影響36
4.1.2 熱迴流萃取瑞香狼毒,不同萃取時間對總黃酮產量之影響42
4.1.3 熱迴流萃取瑞香狼毒,不同萃固液比對總黃酮產量之影響44
4.1.4 熱迴流萃取瑞香狼毒,不同萃取溫度對總黃酮產量之影響46
4.2 熱迴流萃取直交表試驗48
4.3 盆栽試驗53
4.3.1 萃取液中固形物含量測定53
4.3.2 瑞香狼毒萃取液對甘藍之蟲害防治試驗結果(第一階段)55
4.3.3 瑞香狼毒萃取液對包心白菜之蟲害防治試驗結果(第一階段)65
4.3.4 瑞香狼毒萃取液對蔬菜作物之蟲害防治試驗(第一階段)結果討論75
4.3.5 瑞香狼毒萃取液對包心白菜之蟲害防治盆栽試驗(第二階段 76
4.3.6 瑞香狼毒萃取液對包心白菜之蟲害防治盆栽試驗(第三階段)81
5. 結論85
參考文獻88
附錄91

圖目錄

圖1 瑞香狼毒植株及其根、花4
圖2 瑞香狼毒植株及其根、花4
圖3 類黃酮基本結構7
圖4 狼毒素結構式10
圖5 狼毒色原酮結構式10
圖6 香豆素基本結構11
圖7 瑞香素基本結構12
圖8 傘形花內酯基本結構12
圖9 百滅寧結構式18
圖10 瑞香狼毒植株22
圖11 熱迴流萃取直交表條件配置28
圖12 試驗流程圖35
圖13 熱迴流萃取瑞香狼毒–不同濃度的甲醇對總黃酮產率的影響39
圖14 熱迴流萃取瑞香狼毒–不同濃度的乙醇對總黃酮產率的影響40
圖15 熱迴流萃取瑞香狼毒–不同濃度的異丙醇對總黃酮產率的影響 41
圖16 熱迴流萃取瑞香狼毒–不同萃取時間對總黃酮產率的影響43
圖17 熱迴流萃取瑞香狼毒–不同固液比對總黃酮產率的影響45
圖18 熱迴流萃取瑞香狼毒–不同萃取溫度對總黃酮產率的影響47
圖19 熱迴流萃取瑞香狼毒總黃酮 –L9(33)各項萃取因子之訊號與雜訊(S/N)比值51
圖20 熱迴流萃取瑞香狼毒 – 最佳條件進行連續3次萃取總黃酮52
圖21 狼毒萃取液對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果57
圖22 溶劑對照組對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果58
圖23 狼毒萃取液對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果59
圖24 溶劑對照組對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果60
圖25 甲醇萃取液對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)61
圖26 甲醇對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)61
圖27 乙醇萃取液對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)62
圖28 乙醇對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)62
圖29 異丙醇萃取液對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)63
圖30 異丙醇對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)63
圖31 百滅寧對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)64
圖32 水對照組對甘藍盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)64
圖33 狼毒萃取液對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果67
圖34 溶劑對照組對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果68
圖35 狼毒萃取液對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果69
圖36 溶劑對照組對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果70
圖37 甲醇萃取液對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)71
圖38 甲醇對照組對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)71
圖39 乙醇萃取液對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)72
圖40 乙醇對照組對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)72
圖41 異丙醇萃取液對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)73
圖42 異丙醇對照組對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)73
圖43 百滅寧對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)74
圖44 水對照組對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第五週)74
圖45 狼毒萃取液提高濃度對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果78
圖46 異丙醇萃取液(高濃度)對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第三週)79
圖47 百滅寧對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第三週)79
圖48 異丙醇萃取液對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第三週)80
圖49 異丙醇萃取液對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第四週)80
圖50 狼毒萃取液提高濃度對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果83
圖51 異丙醇萃取液(0.05 g/mL)對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第三週84
圖52 水對照組對包心白菜盆栽蟲害防治之試驗結果(第三週)84

表目錄

表1 黃酮類化合物的結構分類8
表2 熱迴流萃取瑞香狼毒–不同溶劑對總黃酮產率的影響38
表3 熱迴流萃取瑞香狼毒直交表各因子及參數範圍49
表4 熱迴流萃取瑞香狼毒- L9(33)直交試驗設計表50
表5 熱迴流萃取總黃酮- L9(33)直交表的訊號與雜訊(S/N)比值51
表6 不同溶劑萃取的萃取液總固形物含量比較54
表7 狼毒萃取液對甘藍蟲害防治第一階段試驗結果56
表8 狼毒萃取液對包心白菜蟲害防治第一階段試驗結果66
表9 狼毒萃取液對包心白菜蟲害防治第二階段試驗結果77
表10 狼毒萃取液對包心白菜蟲害防治第三階段試驗結果82

參考文獻

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