臺灣博碩士論文加值系統

全世界共有多肉植物一萬餘種，在植物分類上隸屬於五十幾科。常見的多肉植物主要有景天科、龍舌蘭科、大戟科、夾竹桃科、蘆薈科、番杏科等。傳統多肉植物的繁殖方式通常以種子實生、扦插法和分株法繁殖，但這些方法有許多缺點，例如種子通常難以獲得、發芽率較低且幼苗生長緩慢；扦插繁殖速率低；而利用母體分株的個體有限，無法獲得大量的苗。故其繁殖數量受限。因此組織培養技術對於多肉植物的繁殖潛力受到了極大的關注。本研究以觀音蓮(Sempervivum tectorum)的頂芽和壽(Haworthia retusa)的叢生芽作為培植體，利用器官再生途徑分化成完整植株，並且測試不同植物生長調節劑，找出最適當培養基組合，可在短時間繁殖大量且具有相同型態的後代植株。
本研究實驗證明觀音蓮的頂芽可以在MS鹽類添加BA和NAA的多種濃度組合中成功誘導出癒傷組織。這些癒傷組織在無添加植物生長調節劑的MS培養基中可以誘導芽體產生，而芽體的增殖則分別試驗植物生長調節劑、醣類濃度和水晶洋菜濃度的影響。經實驗證明，分別以NAA 0.2 mg/L、MS 2.2 g/L、10 g/L蔗糖、5 g/L水晶洋菜所產生的平均芽體數最多。將新生芽培養於含有IBA 5 mg/L的MS培養基為發根最適培養基。
在以壽的叢生芽為培植體的實驗證明，芽體培養於BA 2 mg/L和NAA 1 mg/L的MS培養基為最佳誘導癒傷組織的培養基；癒傷組織培養於花寶F1 2g/L和NAA 0.2 mg/L的培養基，誘導芽體形成率為最高；芽體增殖則以BA 1 mg/L和NAA 0.5 mg/L的MS培養基有最大增殖率。將新生芽培養於NAA 0.05 mg/L為最適發根培養基。
本論文亦將觀音蓮及壽的癒傷組織、芽體、根部作為材料，經由組織石蠟切片觀察分析癒傷組織分化、芽體再生及根再生之過程，建立完整的觀音蓮及壽的器官形態形成之過程。

There are more than ten thousand species of succulent plants in the world and all of the succulents belong to 50 families in botanical classification. In some families, such as Agavaceae, Aizoaceae, Aloaceae, Apocynaceae, Crassulaceae, Euphorbiaceae, most of their member species are succulents and common in the market. Traditionally they are propagated by seeding, cutting and division of the parent plants. However, the number of offspring is limited and the chances of success with these propagation methods are low due to difficulty in obtaining seeds, low germination rate and damages in cutting propagation. Therefore, in vitro propagation of succulent plants draws a lot of attention. The purpose of this study aims at using shoot apex of Sempervivum tectorum and cluster buds of Haworthia retusa to establish organogenesis clonal propagation system for these species. The results indicated that the basal parts of nodal segment of Sempervivum tectorum cultured in MS medium with different combinations of BA and NAA were successfully induced callus. Callus, under no influence of hormones, protruded shoot formation. The effects of different MS salts concentration, sucrose amount added and gelrite concentration on the bud proliferation were experimented. The medium contain with NAA 0.2 mg/ L; MS 2.2 g/L; 10 g/L sucrose; 5 g/L gelrite resulted in the best proliferation of shoots. MS medium supplemented with IBA 5 mg/L subsequently produced maximum roots number. In Haworthia retusa, after a series experiment, callus were obtained from shoot explant when cultured on MS medium supplemented with BA 2 mg/L and NAA 1 mg/ L. For shoot differentation we tested the effects of different combinations of hormones. Shoots formation was optimal on F1 medium supplemented with NAA 0.2 mg/ L. For shoot propagation it was found when cultured on MS medium supplemented with BA 1 mg/L and NAA 0.5 mg/L result in the best proliferation of buds. Rooting was achieved on MS medium with NAA 0.05 mg/L.This study establish complete regeneration system of Sempervivum tectorum and Haworthia retusa by tissue culture. Morphogenetic studies of callus differentiation, shoot and root regeneration were also analyzed.

目錄
摘要 I
Abstract II
致謝 III
目錄 IV
表目錄 VI
圖目錄 VII
第一章、前言 1
1.1研究緣起 1
1.2前人研究 2
1.2.1多肉植物介紹 2
(1)多肉植物市場發展概況 3
(2)觀音蓮的植物介紹 4
(3)壽的介紹 4
1.2.2多肉植物組織培養之研究 5
(1)多肉植物癒傷組織的誘導 5
(2)多肉植物癒傷組織誘導芽體 6
(3)多肉植物芽體增殖 6
(4)多肉植物誘導根系 7
第二章、材料與方法 8
2.1植物材料 8
2.2觀音蓮與壽之癒傷組織誘導試驗 8
2.3觀音蓮與壽器官再生途徑之誘導芽體試驗 8
2.4芽體增殖試驗 9
(1) 植物生長調節劑 9
(2)鹽類、蔗糖和水晶洋菜濃度 9
2.5芽體誘導不定根試驗 10
2.6觀音蓮及壽組織石蠟切片製備 10
2.7統計分析 10
第三章、結果 11
3.1觀音蓮與壽之癒傷組織誘導試驗 11
3.2觀音蓮與壽器官再生途徑之誘導芽體試驗 11
3.3芽體增殖試驗 12
(1)植物生長調節劑 12
(2)鹽類濃度 12
(3)蔗糖濃度 13
(4)水晶洋菜濃度 13
3.4誘導不定根形成 13
3.5石蠟切片觀察分化過程 14
第四章、討論 15
4.1癒傷組織誘導之探討 15
4.2誘導芽體之探討 16
4.3芽體增殖探討 16
(1)植物生長調節劑 16
(2)不同鹽類濃度 17
(3)蔗糖及水晶洋菜濃度 17
4.4誘導不定根形成之探討 18
4.5石蠟切片觀察生長過程之探討 18
第五章、結論 19
第六章、參考文獻 20

 
表目錄
表一. 不同濃度的BA和NAA組合對觀音蓮頂芽癒傷組織形成之影響。 23
表二. 不同濃度的BA和NAA組合對壽的芽體癒傷組織形成之影響。 24
表三. 觀音蓮癒傷組織在不同鹽類及NAA濃度對芽體形成之影響。 25
表四. 不同濃度的NAA對壽癒傷組織芽體形成之影響。 26
表五. 觀音蓮頂芽於不同植物生長調節劑及培養基對總芽體數之影響。 27
表六. BA、NAA濃度組合對觀音蓮頂芽芽體數之影響。 28
表七. BA、NAA濃度組合對壽芽體平均數之影響。 29
表八. 培養基鹽類濃度對觀音蓮芽體平均數之影響。 30
表九. 培養基中蔗糖含量對觀音蓮芽體平均數之影響。 31
表十. 培養基中水晶洋菜含量對觀音蓮芽體平均數之影響。 32
表十一. 觀音蓮頂芽於不同植物生長調節劑對發根之影響。 33
表十二. BA、NAA濃度組合對壽發根之影響。 34


 
圖目錄
圖 1. 觀音蓮頂芽在全量MS培養基中誘導形成的淺綠色癒傷組織。 36
圖 2.壽的芽體培養於BA 2 mg/L和NAA 1 mg/L的MS培養基有癒傷組織的產生。 37
圖 3. 觀音蓮的癒傷組織誘導新生芽體。 38
圖 4. 壽的癒傷組織誘導新生芽體。 39
圖 5. 觀音蓮在植物生長調節劑及鹽類之芽體增殖。 40
圖 6. 觀音蓮在蔗糖及水晶洋菜之芽體增殖。 41
圖 7. 壽芽體增殖情形。 42
圖 8. 觀音蓮芽體發根的情形。 43
圖 9. 壽芽體發根的情形。 44
圖 10. 觀音蓮癒傷組織石蠟切片。 45
圖 11. 觀音蓮芽體石蠟切片。 46
圖 12. 觀音蓮根部組織石蠟切片。 47
圖 13. 壽癒傷組織石蠟切片。 48
圖 14. 壽植株在培養基誘導長出新芽的石蠟切片。 49
圖 15. 壽根部組織石蠟切片。壽基盤之橫切面，根原基原始細胞。 50
圖 16. 壽植株在培養基誘導長出不定根的石蠟切片。 51

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