臺灣博碩士論文加值系統

鰻魚為本省主要之養殖魚類，廣佈於西南和東北沿海，而台灣西南沿海之重金屬銅
、鋅污染嚴重，為知銅、鋅對養殖鰻魚之影響，乃首先探討鰻魚肝細胞懸浮液之製
備條件，再以鰻魚肝細胞為材料，探討銅、鋅對其細胞活存率之影響。得知以二段
式灌流，即先清除肝臟血液，再利用酵素消化肝臟結締組織，則可製備鰻魚肝細胞
。而製備所得之鰻魚肝細胞，其在Krebs-hepes buffer中之較佳懸浮條件似乎為懸
浮溫度25℃或37℃，懸浮密度2×10cells/ml ，懸浮液pH7.5 ；其次，懸浮液添
加5.6 mM葡萄糖和2.5 mM鈣離子對鰻魚肝細胞懸浮之活存率亦有提高之效用。另外
，當應用分離之鰻魚肝細胞作為毒性實驗時，為維持控制組之細胞活存率在90﹪以
上起見，似乎以懸浮２小時為限較佳。
為知銅、鋅和銅鋅共存對鰻魚肝細胞的毒性，乃以不同銅(0-600μM)、鋅(0-2000
μM)、銅鋅混合(0-1600μM Cu﹢4800μM Zn)濃度懸浮鰻魚肝細胞，經檢測肝細胞
之活存率，得知隨著懸浮液中重金屬濃度之增加，鰻魚肝細胞之活存率減少，且隨
著懸浮時間之增長，鰻魚肝細胞之活存率有下降之趨勢，而且其細胞內之重金屬吸
收量隨著懸浮液中重金屬濃度之增加而增加。當銅、鋅分別加入鰻魚肝細胞之懸浮
液中，銅和鋅對鰻魚肝細胞之2hr LC50值分別為490μM和1576μM ，可知銅對鰻魚
肝細胞之毒性較鋅者為強，其毒性約為鋅者之３倍。但當銅鋅以１：３濃度混合加
入鰻魚肝細胞懸浮液中，銅、鋅對鰻魚肝細胞之2hr LC50值分別為1734μM 和5200
μM ，可知銅鋅間對鰻魚肝細胞毒性之交互影響則為一種抑制作用。
另將鰻魚肝細胞懸浮在添加銅之培養液中，其肝細胞之malondialdehyde (MDA) 值
，隨著銅濃度的增加而上升。另外，銅對鰻魚肝細胞之 superoxide dismutase
(SOD)、glutathione (GPx)和catalase等活性之影響，在開始懸浮時，添加銅之各
組懸浮液者均較對照組者為高；但在懸浮２小時後，則對照組者較其它各組者為高
。其次，不同鋅濃度對鰻魚肝細胞之MDA 值並無顯著影響，且對SOD 及GPx 活性，
在懸浮初期或懸浮２小時後，亦均無顯著影響；鋅對鰻魚肝細胞catalase活性的影
響，在鋅濃度高達1000μM 時，其活性在懸浮初期即有上升之現象，當懸浮２小時
後，則各組間均無顯著差異。銅鋅共存組對鰻魚肝細胞脂質氧化之影響則與銅之結
果類似，但其變化較銅單獨存在者為小。銅鋅共存下對鰻魚肝細胞SOD 及GPx 活性
的影響，則與鋅單獨添加者類似，唯當濃度高達1600μM 銅﹢4800μM 鋅時，鰻魚
肝細胞之SOD 和GPx 活性則明顯下降，且較控制組者為低。銅鋅共存對鰻魚肝細胞
catalase活性的影響則與銅單獨添加者類似。