臺灣博碩士論文加值系統

魚腥草(Houttuynia cordata)為三百草科(Saururaceae)及金銀花(Lonicera japonica Thunb)為忍冬科(Caprifoliaceae)多年生草本植物。本研究針對魚腥草不同陰乾條件方法(鮮品、冷凍乾燥、室內陰乾)及陰乾金銀花，並用95%乙醇進行萃取，評估魚腥草及金銀花陰乾品萃取物的抗氧化活性、美白與皮膚傷口癒合效力以及發炎活性所得結果，以評估不同陰乾方法對魚腥草、金銀花粗萃物之藥理活性的影響。
實驗結果發現在台灣魚腥草冷凍乾燥及台灣金銀花室內陰乾50℃加熱4小時並以95%乙醇萃取的濃縮條件下所得到的魚腥草、金銀花粗萃物對清除(DPPH)自由基的作用與酪胺酸酶活性之抑制率含量均較高，而進行複方比對。DPPH自由基的作用之清除率含量較高為魚腥草:金銀花( 3 : 1 )，其次是魚腥草:金銀花( 1 : 4 )。對酪胺酸酶活性之抑制率以魚腥草:金銀花( 1 : 3)效果最好。其次為魚腥草:金銀花( 1 : 2)。再進一步進行瓊脂擴散抑菌試驗對金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌以台灣魚腥草與台灣金銀花都有明顯差異，而複方以魚腥草:金銀花( 3 : 1 )抑菌效果最好。另外，魚腥草:金銀花( 3 : 1 )對小鼠黑色素腫瘤細胞(B16 melanoma cells)具有毒殺的效果，和對LPS誘導RAW264.7 Cells發炎也具有抗炎作用。在成分分析中魚腥草:金銀花( 3 : 1 )含有豐富綠原酸、槲皮素及木犀草素。因這次主題是針對抗菌、發炎為主，所以從上面五項初測試驗結果中，選出魚腥草:金銀花( 3 : 1 )來進一步製成軟膏，發現可以增加大鼠傷口表皮及肉芽組織的增生速度，有助於傷口癒合。本實驗所得結果可當為製藥、化妝品工業日後進行魚腥草、金銀花炮製製程的參考。
關鍵字 : 魚腥草、金銀花、抗氧化、美白、抑菌、傷口癒合
 

Both Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb are perennial herbs that belong to Saururaceae and Caprifoliaceae, respectively. In this study, we focused on the different conditions of Houttuynia cordata (including fresh materials, frozen dried and shade dried) combined with the shade dried Lonicera japonica Thunb to be extracted with 95% ethanol, and further evaluated the anti-oxidation, skin whitening, wound healing, and anti-inflammatory activities of the Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb crude extracts with different shade-dried conditions. The results revealed that the frozen-dried Houttuynia cordata and shade-dried Lonicera japonica Thunb crude extracts obtained from the extraction by 95% ethanol heated at 50 ℃ for 4 hours showed a higher inhibitory effect on the scavenging of free radicals and the activity of tyrosine kinase. The prescription of Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb extracts at a ratio of 3 : 1 showed a higher free radical scavenging activity, whereas at a ratio of 1 : 3 showed a higher inhibitory activity of tyrosine kinase. In addition, it showed significant differences of anti-bacteria activities (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, and Escherichia coli) between Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb, and the prescription of Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb extracts at a ratio of 3 : 1 exerted the best anti-bacteria activity. Moreover, the prescription of Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb extracts at a ratio of 3 : 1 had a cytotoxicity activity to B16 melanoma cells, and also had an anti-inflammatory activity in lipopolysaccharide-induced inflammation in RAW264.7 Cells. In the component analysis of Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb, the prescription of Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb extracts at a ratio of 3 : 1 has chlorogenic acid, quercetin, and luteolin in rich. Since the aim of this study is focused on the anti-bacteria and anti-inflammatory activities of the study materials. Thus, among the five pre-tested results, we used the extracts of Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb at a ratio 3 : 1 to manufacture an ointment. We found that the ointment facilitated the growth of epithelial cells and granuloma to show benefits in the wound healing. Taken together, the results obtained in this study provided information of refine or decoct of Houttuynia cordata and Lonicera japonica Thunb for the pharmaceutical and cosmetics industries in the future.

Key word: Houttuynia cordata、Lonicera japonica Thunb、antioxidant、whitening、anti-bacteria、wound healing capacity
 

誌謝 I
中文摘要 II
Abstract III
目錄 V
表目錄 IX
圖目錄 X
第一章前言 1
第二章文獻回顧 3
第一節魚腥草、金銀花簡介 3
(一) 魚腥草簡介 3
(二) 金銀花簡介 7
第二節魚腥草與金銀花成分綠原酸、槲皮素及木犀草素之文獻考察 14
(一) 綠原酸之理化性質及傷口癒合作用 14
(二) 槲皮素之理化性質及對傷口癒合作用 15
(三) 木犀草素之理化性質及對傷口癒合作用 16
第三節濕疹簡介 17
(一) 西醫觀點定義濕疹 17
(二) 中醫觀點定義濕疹 18
(三) 濕疹和細菌關係 19
(四) 濕疹與發炎關係 21
(五) 濕疹與傷口癒合關係 23
(六) 濕疹與黑色素細胞（Melanocytes）關係 25
第三章 研究動機與架構 28
第一節 研究動機 28
第二節 實驗設計 29
第四章 材料與方法 30
第一節 實驗材料 30
(一) 藥材來源 30
(二) 儀器設備 30
(三) 實驗動物 31
(四) 細胞株 31
(五) 試驗菌株 32
(六) 實驗藥品 32
第二節 實驗步驟與方法 34
(一) 魚腥草、金銀花的炮製 34
(二) 魚腥草、金銀花萃取產率 35
(三) 台灣魚腥草組織切片 35
(四) 體外清除自由基效力測定 36
(五) 酪胺酸酶活性抑制試驗 37
(六) 黑色素細胞毒性測定 38
(七) 瓊脂擴散抑菌試驗 40
(八) 抗發炎試驗活性評估 (Nitrite assay) 40
(九) 液相層析系統分析 42
(十) 傷口癒合藥效之探討 44
(十一) 統計方式 47
第五章 結果與討論 48
第一節 台灣產魚腥草組織切片 48
第二節 魚腥草與金銀花的萃取產率 48
第三節 魚腥草、金銀花及複方清除DPPH 自由基效力評估 48
第四節 酪胺酸酶活性之抑制作用 49
第五節 B16 細胞毒性測定 49
第六節 瓊脂擴散抑菌試驗 49
第七節 發炎細胞激素IL-6 之分泌生成量 50
第八節 抗發炎細胞激素IL-10 分泌生成量 50
第九節 綠原酸、槲皮素及木犀草素含量分析 50
第十節 傷口癒合藥效之探討 51
(一) 傷口收縮藥效之探討 51
(二) 病理組織染色之探討 51
第六章 結論 53
第七章 參考文獻 86

方靜文(2004) 金銀花活性成分綠原酸之定量研究。中國醫藥大學中
國藥學研究所碩士論文，1-21。
王天志，李永梅(2000) 金銀花的研究發展。華西藥學雜誌 15：
292-298。
王立娟(2010) 金銀花的研究進展。醫學資訊 (8):2293-2295。
王文信(2003) 金銀花及其成分木犀草素改善藥物誘發大鼠記憶障礙
作用之研究。中國醫藥大學中國藥學研究所碩士論文，13。
中文百科在線(2010) http://www.zwbk.org。
中醫研究院中藥研究所病毒組(1973) 中草藥對呼吸道病毒致細胞病
變作用的影響。新醫藥學雜誌 (1)：26。
史惠，任利斌(1998) 黔產魚腥草揮發油抑菌作用的初步研究。貴陽
中醫學院學報。3：61-64．
甘偉松(1977) 藥用植物學。國立中國醫藥研究所出版，426-527 頁。
台灣植物誌編輯委員會(2003) 台灣植物誌，被子植物。雙子葉類，2。
百度百科(2013) http://baike.baidu.com/view/29729.htm。
李曰慶(2004) 中醫外科學。 中國中醫藥出版社，181。
李瑞瑜(2009) 台灣產山藥炮製前後成分與活性變化之研究。大仁科
技大學製藥科技研究所碩士論文，28。
李俊仁(2002) 實用外科學，台北:金名出版社，263-285。
呂葳婕(2006) 類黃酮的合成方法與藥理測試。嘉南藥理科技大學藥
物科技研究所碩士論文，3-7。
沈剛旭(2004) 細菌與異位性濕疹和非異位性濕疹的關係。國位彰化
師範大學生物學系碩士論文，9-10。
邵蘭、于慶海、徐靜華(2000) 合成魚腥草素對環磷醯胺模型小鼠免
疫功能的影響。瀋陽藥科大學學報 17(2)：132。
季宇彬(1995)中藥有效成分藥理與應用，哈爾濱: 黑龙江科学技术出
版社，1-111。
邱淑燕(2007) 炮製前後何首烏和五味子的成分分析及藥理活性的評
估。大仁科技大學製藥科技研究所碩士論文，31。
吳志華(2008) 皮膚病學與性病學。廣東科技出版社，198-201。
林於粲(2005) 金黃色葡萄球菌超級抗原造成異位性皮膚炎皮膚過敏
性發炎反應之持續與惡化的分子機轉。國立台灣大學醫學院臨床
醫學研究所碩士論文，4。
林威宏(2010) 魚腥草與芭樂葉萃取物之抗氧化活性探討。國立台灣
海洋大學食品科學系碩士論文，3。
林國隆(2003) 紫草素及其衍生物對內毒素致發炎反應之機制。國立
台灣大學毒理學研究所碩士論文，3。
洪伊昇(2008) 膠原蛋白/玻尿酸奈米纖維基質之製備及其傷口癒合之
應用。國立臺灣海洋大學生物科技研究所碩士學位論文，7-8。
洪綉茹(2005) 3T3-L1 脂肪細胞培養及分化平台建立及其應用於活性
藻類的篩選。國立中央大學生命科學研究所碩士論文，20。
莫冰、餘克花(2008) 板藍根和氟腥草抗流感病毒研究。江西醫學院
學報 48(4)：44-46。
國家中醫藥管理局中華本草編委會(1999 )中華本草第三冊，上海:上
海科學技術出版社，415-418。
陳曉清(2007)魚腥草與茵陳多糖提取物的抗菌活性。微量元素與健康
研究。24(5)：17-18。
陳盈君(2009) 乾燥條件對魚腥草素成份影響之研究。國立宜蘭大學
食品科學系碩士論文，4-18。
陳長勳、王櫻(2009) 魚腥草、炮薑、附子抗大鼠壓力超負荷心室再
構作用的比較研究。中成藥31(1)：24-30。
陳奕瑋(2001) 石蓮萃取物對洋菇酪胺酸酶活性之影響。靜宜大學應
用化學系碩士學位論文，15-17。
張雅芬、陳琬琳、黃俊彥、熊國棟、謝秀伶、林尚明(2005) 魚腥草
與金銀花萃取物之抗菌性研究。第二十一屆纖維紡織科技研討
會，252-255。
張淑芬(1995) 魚腥草治百病。台北：暖流出版社，45-67。
張美玲(2003) 台灣產毛忍冬之化學成分研究。中國醫藥學院中國藥
學研究所碩士論文，16-21。
張紅峰、自豔軍、藍宇淑，等(2000) 中藥金銀花提取物體外抑菌作
用。華東師範大學學報(自然科學版) (1):107-110。
張英睿(2009) 常見皮膚病學。台北市:合記圖書出版社，295-296。
張志禮(2001) 張志禮皮膚病臨床經驗輯要。北京：中國醫藥科技出
版社，105。
維基百科(2013) https://zh.wikipedia.org/wiki。
路統信(1992) 青草集。台北:豐年社青草藥編輯委員會，75-78。
雷載權(2002) 中藥學。上海:上海科學技術出版社， 41-75。
趙菊宏(2010) 金銀花的藥理學研究和臨床應用。中國醫藥指南，
8(32):195-196。
楊啟裕(2004) 富含槲皮素中草藥之代謝動力學及其與環孢靈之交互作用。
中國藥學研究所碩士論文，18。
楊慧、李劍琦、楊斌、冷紅文、何士勤、俞紅 (2006) 魚腥草抗甲l
型流感病毒誘導細胞程式化死亡的初步研究。江西醫藥 41(12) :
960-961。
劉琪(2012) 金銀花化學成分及藥理作用分析。科技創新與應用(下)，
45。
劉振軒等(1996) 組織病理染色技術與圖譜-組織化學染色。台灣養猪
科學研究所，28-32。
鄭景峯(2005) 六十種中藥材熱水萃出物對痤瘡病原菌之抑菌性。大
同大學生物工程研究所碩士論文，15。
薛煜彬(2008) 葡萄與葡萄細胞乙醇萃取物對抑制酪胺酸酶活性之效
能評估。亞洲大學生物科技學系碩士論文，8。
謝長富、黃增泉(1978) 台灣植物誌第一版。台灣植物誌第一版編輯
委員會，709。
謝長富、黃增泉(1996) 台灣植物誌第二版。台灣植物誌第二版編輯
委員會，620。
顧靜蓉、馮莉莉、羅建偉、毛慶秋(2006) 魚腥草的藥理作用及臨床
應用新進展。海峽藥學 18(14)：l21-l23。
Aly R, Maibach HI and Shinefield HR. (1977) microbial flora of atopic
dermatitis. Archives of Dermatology. 113(6):780-782.
ATCC connection (2004) Cryogenic Preservation of Animal Cells.
24:10-11.Bohm F, Haley J, Truscott T, Schalch W (1993) Cellular
bound ß-carotene quenches singlet oxygen in man. Journal of
Photochemistry and Photobiology. 21:219-221.
Chen WC, Liou SS, Tzeng TF, Lee SL and Liu IM. (2013) Effect of
topical application of chlorogenic acid on excision wound healing in
rats. Planta Medica. 79(8):616-621.
Cynthia A.W. (2004) The wound healing process symphony: part I.
Dermatology Nursing . 16(1): 67-72.
Cynthia A.W. (2004) The wound healing process symphony: part II.
Dermatology Nursing. 16(2): 179-180.
Cynthia A.W. (2004) The wound healing process symphony: part III -the
finale. Dermatology Nursing. 16(3): 274-295.
Chiang LC, Chang JS, Chen CC, Ng LT and Lin CC (2003)
Anti-Herpes simplex virus activity of Bidens pilosa and Houttuynia
cordata. The American Journal of Chinese Medicine. 31(3):355-362.
Dekel R, Zvibel I, Brill S, Brazovsky E, Halpern Z and Oren R (2003)
Gliotoxin ameliorates development of fibrosis and cirrhosis in a
thioacetamide rat model. Digestive Diseases and Sciences.
48(8):1642-1647.
Dooley , T. P. (1997)Topical skin depigmentation agents: current products
and discovery of novel inhibitors of melanogenesis. Journal of
Dermatological Treatment. 8: 275-283.
Diegelmann RF and Evans MC (2004) Wound healing: an overview of
acute, fibrotic and delayed healing. Frontiers in Bioscience.9:
283-289.
Gomathi K, Gopinath D, Rafiuddin Ahmed M and Jayakumar R. (2013)
Quercetin incorporated collagen matrices for dermal wound healing
processes in rat. Biomaterials. 24(16):2767-2772.
Graumann, P. (2007) Bacillus : Cellular and Molecular Biology. Caister
Academic Press. 2-7.
Guyton AC. (1989) Dominant role of the kidneys and accessory role of
whole-body autoregulation in the pathogenesis of hypertension.
American Journal of Hypertension. 2(7):575-85.
Hayashi K, Kamiya M and Hayashi T (1995) Virucidal effects of the
steam distillate from Houttuynia cordata and its components on
HSV-1, influenza virus, and HIV. Planta Medica. 61(3):237-241.
K. S. Wayne, G. D. Alexander, and R. T. Gordon.(1998) Physiology and
healing dynamic of chronic cutaneous wounds. The American
Journal of Surgery. 176(2A Suppl): 26S–38S.
Kim YJ and Uyama H (2005) Tyrosinase inhibitors from natural and
synthetic sources: structure, inhibition mechanism and perspective
for the future. Cellular and Molecular Life Sciences.
62(15):1707-1723.
Lee HG, Yu KA, Oh WK, Baeg TW, Oh HC, Ahn JS, Jang WC, Kim JW,
Lim JS, Choe YK and Yoon DY (2005) Inhibitory effect of
jaceosidin isolated from Artemisia argyi on the function of E6 and
E7 oncoproteins of HPV 16. Journal of Ethnopharmacology.
98(3):339-343.
Leyden JJ, Marples RR and Kligman AM( 1974) Staphylococcus aureus
in the lesions of atopic dermatitis. British Journal of Dermatology.
90:525-530.
Luo LH, Kim HJ, Nguyen DH, Lee HB, Lee NH and Kim
EK(2009)Depigmentation of Melanocytes by (2Z,8Z)-Matricaria
Acid Methyl Ester Isolated from Erigeron breviscapus. Biological &
Pharmaceutical Bulletin. 32(6):1091-1094.
Lowell A (1983) Golgsmith: Biochemistry and Physiology of the skin.
Oxford University Press. 7-35.
Masenga J, Grabe C, Wagner J and Orfanos CE (1990) Staphylococcus
aureus in atopic dermatitis and in nonatopic dermatitis. International
Journal of Dermatology. 29:579-582.
Pawelek JM, Korner AM (1982) The biosynthesis of mammalian
melanin. American Science. 70: 136-45.
Prota G (1996) Melanins and Melanogenesis. Cosmetic and Tolletries
Magazine . 111: 43-51.
Shan B, Cai YZ, Brooks JD and Corke H. (2007)The in vitro antibacterial
activity of dietary spice and medicinal herb extracts.International
Journal of Food Microbiology，117(1):112-119.
Sabiston, J. L. 原著，梁金銅編譯(2002) 莎氏外科學精要。台北:藝軒
圖書公司，123-129。
Sato J, Goto K, Nanjo F, Kawai S and Murata K.(2000) Antifungal
activity of plant extracts against Arthrinium sacchari and
Chaetomium funicola.Journal of Bioscience and Bioengineering.
90(4)：442-446．
Stadelmann WK, Digenis AG and Tobin GR(1998) Physiology and
healing dynamic of chronic cutaneous wounds. The American
Journal of Surgery .176(2A Suppl):26S-38S.
Xiaoli Ye,Xuegang Li, Lujiang Yuan, Linhu Ge, Baoshun Zhang and
Shaobo Zhou ( 2007) Interaction of houttuyfonate homologues with
the cell membrane of gram-positive and gram-negative bacteria.
Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering
Aspects.301：412-418．
Yan Y. F., Chen X., Yang X. Q., Wu S., Fang D. F. and Dong C. G.(2002)
Cooperative anti-influenza virus activities of amantadine, ribavirin
and Herby Houttuynia.Virologica Sinica.17(2):192-194.
Yamaguchi T, Takamura H, Matoba T, Terao J (1998) HPLC method for
evaluation of the free radical-scavenging activity of foods by using
1,1-diphenol-2-picrylhydrazyl.Bioscience Biotechnology and
Biochemistry. 62:1201-1204.