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矮南瓜黃化嵌紋病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV )與西瓜嵌紋病毒-1 (Watermelon mosaic virus-1,WMV-1 )屬於Potyvirus 群,皆以非永續性方式經蚜 蟲媒介傳播,而在蚜蟲傳播上,協助成份(Helper component)扮演重要角色。因此 ,為探討兩種病毒之協助成份與媒介病毒之關係,首先進行病毒純化試驗。試驗中利 用方法I與方法Ⅱ兩種不同步驟,分別純化ZYMV及WMV-1,結果在純化過程 中,以方法Ⅱ之步驟較適合於兩病毒的純化。再依方法Ⅱ之步驟,分別於該緩衝液中 添加還原劑,鉗合劑或不同pH值,以進行一系列比較試驗,結果得知,病毒的純化 以0.5M,7.0,內含0.1%NaSO之鉀鹽磷酸緩衝液最為適當。 為瞭解兩病毒之協助成份性質,以不同分離與濃縮分別萃取粗汁液中協助成份或製備 部分純化之協助成份,再依蚜蟲人工膜餵食試驗(Artificial membrane feeding ) ,探討協助成份的活性,結果兩病毒協助成份皆在0.5M,pH8.0,內含0. 1%NaSO之鉀鹽磷酸緩衝液中活性最高,但若以兩病毒協助成份相比較,則 發現WMV-1協助成份穩定性較高,又兩種協助成份易受純化病毒時所用有機溶媒 氯仿、四氯化碳或界面活性劑Triton*-100作用而失去活性。而將兩病毒協助成 份互換進行蚜蟲媒介病毒試驗,發現兩種協助成份對異源病毒(heterologouts vir- us)協助能力皆比同源病毒(homologous virus)降低三倍左右,由此表示,病毒之 協助成份隨種類不同而有某些程度的專一性。同時,使用Sepharose CL-6B 凝膠過濾 進一步純化兩病毒之協助成份,結果所得三種不同分子量的純化試液,尚無發現傳播 病毒能力,至於原因,則有待進一步研究。
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