臺灣博碩士論文加值系統

本論文主要利用極致高效能液相層析法(Ultra-Performance Liquid Chromatography，UPLC)建立(1)對咳嗽糖漿主成分orciprenaline sulfate、doxylamine succinate及bromhexine HCl同時分析之方法及(2)對環境荷爾蒙bisphenol A、2,4-di-tert-butylphenol、4-n-octylphenol及4-n-nonylphenol同時分析之方法。
第一部分為對特定市售咳嗽糖漿配方中之主成分orciprenaline sulfate(ORCI)、doxylamine succinate(DOX)及bromhexine HCl(BH)建立一個快速、簡單及準確之分析方法，本分析方法使用逆相層析管柱(Waters HSS T3，2.1x100 mm，1.8 μm)，搭配5 mM磷酸二氫鉀(pH 3)緩衝溶液及甲醇之混和移動相，流速0.3 mL/min之梯度沖提方式，於波長210 nm下進行偵測，並且探討分析方法之最佳化。在基本分析方法確效，分析物之檢量線範圍均為1～20 μg/mL，相關係數均r ≥ 0.999，同日內異日間分析方法精密度和準確度之相對標準偏差(R.S.D. %)及相對誤差 (R.E. %) 數值分別小於 1.6 % 及3.0 %；偵測極限(S/N = 3 注入體積10 μL） orciprenaline sulfate及bromhexine HCl為5 ng/mL、doxylamine succinate為50 ng/mL；在應用分析檢測咳嗽糖漿主成分之回收率均達到98 %以上；檢測市售三款咳嗽糖漿產品含量百分率測定orciprenaline sulfate 92.4 ~100.8 %、doxylamine succinate 98.8 ~100.8 %、bromhexine HCl 86.8 ~100.9 % ，本研究已成功開發一個快速檢測咳嗽糖漿中主成分之分析方法並應用於市售咳嗽糖漿主成分含量分析。
第二部分為建立基本檢測分析之方法同時分析環境荷爾蒙Bisphenol A (BPA)、2,4-di-tert-Butylphenol (2,4-di-tert-BP)、4-n-Octylphenol (4-n-OP) 及4-n-Nonylphenol (4-n-NP)，本分析方法選用逆相層析管柱(Kinetex C18，4.6 x100 mm，2.6 μm )，H2O和MeOH (7:93, v/v %)之混合移動相，流速0.3 mL/min等梯度沖提方式於螢光偵測器激發波長230 nm及放射波長305 nm下進行偵測。在基本分析方法之確效採用內部標準法，內部標準品為4-n-Butylphenol(4-n-BP)，檢量線之範圍BPA為1~50 ng/mL，2,4-di-tert-BP、4-n-OP、4-n-NP為1~100 ng/mL，相關係數皆r ≥ 0.999；同日內異日間分析方法精密度和準確度，相對標準偏差(R.S.D. %) 及相對誤差 (R.E. %)其數值分別小於 2.5 %及小於1.6 %；偵測極限（LOD, S/N = 3 注射20 μL）BPA為0.1 ng/mL，2,4-di-tert-BP、4-n-OP、4-n-NP為0.2 ng/mL；在應用分析之方法選用甲苯為萃取之溶劑，可測定之檢量線範圍BPA為2~50 ng/mL，2,4-di-tert-BP、4-n-OP、4-n-NP為2~100 ng/mL，相關係數皆r ≥ 0.999。

In this study, analysis methods were developed for the simultaneous separation and quantification of orciprenaline sulfate, doxylamine succinate and bromhexine HCl in commercial cough syrup (first part) and environmental hormones of Bisphenol A (BPA), 2,4-di-tert-butylphenol (2,4-di-tert-BP), 4-n-octylphenol (4-n-OP) and 4-n-nonylphenol (4-n-NP) in human urine (second part) by ultra-performance liquid chromatography (UPLC).
The first part of this: a simple, rapid and precise method with photodiode array detection (210 nm) was developed for the simultaneous separation and quantification of orciprenaline sulfate(ORCI), doxylamine succinate (DOX)and bromhexine HCl (BH)in commercial cough syrup. For this method used reversed-phase column (Waters HSS T3 column 2.1x100mm, 1.8μm), the mobile phase were 5 mM potassium dihydrogen phosphate (KH2PO4) adjusted to pH 3 and methanol mixed solution with gradient elution The linear range of the method were 1-20 μg/mL for all, respectively(r ≥ 0.999). The R.S.D. and R.E. were all less than 1.6 % and 3.0 % for intraday and interday. The limits of detection were 5 ng/mL for orciprenaline sulfate and bromhexine HCl, 50 ng/mL for doxylamine succinate (S/N = 3, injection 10μL). All the recoveries were greater than 98%. The percent of contents in three kinds of commercial cough syrup samples that orciprenaline sulfate 92.4~100.8 %, doxylamine succinate 98.8~100.8 % and bromhexine HCl 86.8~100.9 %. The method could be used for the quality control assay of the analytes in pharmaceutical products.
The second part of this: application of the method to simultaneous separation and quantification environmental hormones of BPA, 2,4-di-tert-BP, 4-n-OP and 4-n-NP. For this method used reversed-phase column (Kinetex C18 column，4.6 x100 mm，2.6 μm), the mobile phase were H2O and methanol (7:93, v/v %) mixed solution with isocratic and flow was 0.3 mL/min. The fluorescence wavelength (nm) was 230(Ex) and 305(Em). 4-n-Butylphenol (4-n-BP) was used as an internal standard (IS). The linear range of the method is 1-50ng/mL for BPA and 1-100 ng/mL for 2,4-di-tert-BP, 4-n-OP and 4-n-NP, respectively(r ≥ 0.999). The R.S.D. and R.E.were all less than 2.5 % and 1.6 % for intraday and interday.The detection limits (S/N = 3, injection 20μL) was 0.1 ng/mL for BPA and 0.2 ng/mL for 2,4-di-tert-BP, 4-n-OP and 4-n-NP. In urinary analysis, BPA, 2,4-di-tert-BP, 4-n-OP and 4-n-NP were extracted with toluene from urine for subsequent determination. The linear range was 2~50 ng/mL for BPA and 2~100 ng/mL for 2,4-di-tert-BP, 4-n-OP and 4-n-NP.

摘要 i
Abstract iii
致謝 v
目錄 vi
圖目錄 ix
表目錄 xii
第壹章、 緒論 1
第一節、 極致高效能液相層析法對咳嗽糖漿分析介紹 1
一、 咳嗽糖漿研究動機及目的 1
二、 咳嗽糖漿藥物介紹 3
三、 極致高效能液相層析儀 6
四、 文獻分析方法 9
第二節、 極致高效能液相層析法對環境荷爾蒙分析介紹 15
一、 環境賀爾蒙研究動機及目的 15
二、 環境荷爾蒙定義 17
三、 正常荷爾蒙及環境荷爾蒙作用 18
四、 環境荷爾蒙國際間管制 19
五、 雙酚A(Bisphenol A) 21
六、 烷基苯酚化合物(Alkyphenols，APEOS) 22
七、 雙酚A及烷基苯酚化合物分析方法文獻探討 26
第貳章、 實驗試藥及儀器 34
一、 藥品與試劑 34
二、 儀器 36
三、 分析系統 37
第參章、 極致高效能液相層析法對咳嗽糖漿分析方法之建立 38
第一節、 咳嗽糖漿分析方法 38
一、 試劑配製 38
二、 探討基本分析方法 40
三、 基本分析方法之確效 42
四、 應用分析 45
第二節、 咳嗽糖漿分析方法結果與討論 51
一、 基本分析方法之建立 51
二、 基本分析方法之確效 68
三、 應用分析 76
第肆章、 極致高效能液相層析法對環境荷爾蒙分析方法之建立 86
第一節、 環境賀爾蒙分析方法 86
一、 藥品及試劑配製 86
二、 探討基本分析方法 90
三、 基本分析方法確效 92
四、 探討應用分析方法 94
第二節、 環境賀爾蒙分析方法結果與討論 99
一、 基本分析方法之建立 99
二、 基本分析方法確效 103
三、 應用分析方法之建立 109
第伍章、 結論 118
第陸章、 參考文獻 120

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