溴化丁二醯亞胺酸(NBS) 和溴化二羥基五硝基苯 (HNBB) 是兩種會與色胺酸 (Trp)
反應的試劑，會抑制從白化綠豆幼苗所分離出來的腺核甘三磷酸酵素 (Tonoplast
ATPase) 的水解活性。在我們的反應條件下，HNBB只修飾Trp ，而NBS 會與Trp 以
外的其它殘基反應。HNBB對ATPase的抑制作用與其作用濃度與時間皆有關。由抑制
時間與活性之對數作圖可以得到HNBB抑制作用的反應級數為0.973 ，由此可知至少
有一個Trp 涉及在ATP 的水解活性中。另外由動力分析發現NBS 不改變最大反應速
率 (Vmax) 但酵素對受質的解離度改變，而HNBB不改變酵素對受質的解離度但Vmax
變小。而受質及其類似物可以保護ATPase抵抗NBS 的抑制作用，但並不保護HNBB的
抑制作用。綜合以上結果暗示HNBB及NBS 作用在不同的位置。更進一步以此修飾作
用之化學計量學(Stoichiometry) 顯示ATPase中有七個Trp 可被HNBB修飾，但分析
後發現其中一個Trp 對此酵素活性是必須的，這個必須的Trp 並不是位在活化部位
。
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