羅東、深坑及基隆地區家蠅與感性品系相較對馬拉松之抗性比分別為>600、>1500 及>1500 倍;對安丹之抗性比分別為>1700、>2300及>1100 倍;對二氯松之抗性比分 別為31、18及21倍;對亞特松之抗性比分別為14、38及94倍,顯示台灣北部地區家蠅 對馬拉松及安丹具高抗性,對二氯松及亞特松呈中抗性,顯示以殺蟲劑防治家蠅之問 題將有日趨嚴重之勢。 以PB、DEM 及DEF 等協力劑與殺蟲劑共用,結果發現台灣部家蠅對馬拉松及亞特松之 抗性酯酥是主要之解毒酵素;對安丹之抗性則包括P450單氧酥、酯酥及轉基酵;對二 氯松之抗性以標部位之不敏感為其可能抗性機制;對工特松之抗性以酯酵為主要及氧 化酵與轉基酵為次要之解毒代謝酵素。以局部滴定及節間膜注射法LD50比值,發現羅 東家蠅之表皮抗性對亞特松有1.4 倍、馬拉松1.7 倍、二氯松2.1 倍而安丹則超過 7.1 倍,深坑家蠅對亞特松、二氯松、安丹及馬拉松之表皮抗性分別為4.8、4.5 、>7.7及>14.0 ;而芏隆家蠅則分別為3.8、3.5、>9.0及>14.5 倍,顯示降低表皮之 穿透速率是台灣北部地區家蠅之重要抗性因子之一。 在抗、感性家蠅活體外酵素活性之比較,除了酯酵外氧化酵、轉基酵及ACHE之活性, 均為抗性家蠅高於感性;以ACHE為最;此與活體內協力劑之實驗相符。羅東、深坑及 基隆家蠅ACHE比活性與感性家蠅相較分別高3.0、4.0及28.4倍;若以四個家蠅於族群 之頭部ACHE活性與其對亞特松之LD50作直線迴歸可得一明顯之正相關(R=0.99775; P<0.001)。若以雙分子速率常數比(Ki)為不敏感性之判斷標準,羅東、深坑及基隆家 蠅ACHE對安丹之不敏感性分別為14.0、19.1及22.3倍;而對於其它抑制劑亦大多有2 倍以上之不敏感性,顯示台灣北部地區家蠅除了ACHE活性之強化外,其對殺蟲劑之不 敏感性及配合解毒代謝酵素活性之增強為促成其抗性之主要原因。 家蠅ACHE經高速離心、鹽析、凝膠過濾及層析管柱之純化步驟;以硫酸銨鹽析ACHE可 得到1.6 倍之純化倍數;凝膠過濾管柱為8.5 倍;親和層析管柱為19.6倍。 在家蠅頭部ACHE之生化特性及分子型式方面,感性及基隆家蠅之ACHE活性初時隨PH值 增加而增高,但高於PH9.5 以此基隆家蠅ACHE活性有下降趨勢而感性家蠅則否。抗、 感性家蠅胸部之ACHE活性及頭部ACHE對BUSCH 之分解能力在統計上並無明顯的差異。 亢、感性家蠅ACHE對過量ACSCH 有被抑制現象但對BUSCH 則否。單價離子(鉀及鈉) 於低濃度隨著濃度增加可刺激家蠅ACHE活性;但於濃度50MM則有抑制作用,雙價離子 (鈣、鎂及鋇)於50-250MM較單價離子有顯著增強ACHE活性;然BA++及CA++於250MM ;MG++於1000MM則有抑制ACHE活性之作用。基隆及感性家蠅ACHE以ACACH 及BUSCH 為 受質之VMAX及KM,當以ACSCH 為受質時基隆及感性家蠅ACHE之VMAX分別為0.0687+- 0.096um/min/mg protein;km值分別為0.015+-0.006及0.015+-0.003um,若以BUSCH 為受質時基隆及感性家蠅ACHE之VMAX分別為0.323+_0.023及0.0308+-0.028um/min/mg protein;km 值分別為0.011+-0.003及0.014+-0.004um,顯示基隆及感性家蠅ACHE之 km及VMAX與感性家蠅相近,顯示抗、感性家蠅ACHE之催化活性並沒有改變;但其對藥 劑之敏感性卻明顯降低了。 家蠅ACHE在梯度電泳中主要以聚集型式;雙元體及單元體三種分子型式存在,然經自 溶作用可將ACHE大多轉變為雙元體;經還原劑還原作用則可將雙元體完全轉變為單元 體,家蠅ACHE以雙元體為最主要在型式,而單元體可能為雙元體之前身。在不連續電 泳中感性家蠅ACHE三種分子型式之分子量為聚集型式>280+-0KDA;雙元體為136+-9 KDA ;單元體為81+-1.3KDA,基隆家蠅ACHE之聚集型式及雙元體與感性家蠅同;單元 體為80+-1.0KDA。在HPLC膠體管柱中基隆ACHE以兩種聚集型式存在(459.6及 219.6KDA);感性家蠅則以一種聚集型式存在(275KDA),顯示基隆家蠅ACHE較感性容 易聚;集在電泳圖譜中亦有相同之發現,PH值、ACHE濃度及其所在之條件會影響ACHE 聚集之程度、另一項重要之因素為基隆家蠅ACHE帶有較多之厭水性部份因此較易聚。 集感性及基隆家蠅ACHE之等電點分別為5.71+-0.11及5.85+-0.11,在生物統計上雖無 明顯的差異,但在生化觀點上則感性家蠅ACHE適合之氫離子濃度高於基隆家蠅1.4 倍 ;顯示兩家蠅ACHE為不同之分子;可能是部份的胺基酸發生改變導致帶電性之差異。 而此差異或許與基隆家蠅ACHE有較強之聚集特性有關。
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