胡瓜嵌紋病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)是三基因體的植物RNA 病毒，純化之
病毒顆粒包含基因體RNA1、2、3，及次基因體RNA4，四段RNA1和2 分別轉譯1A及2A
蛋白，與轉譯病毒複製有關；RNA3決定二個蛋白，一為外鞘蛋白，由次基因體RNA4
而來，具有包被病毒RNAs的功能，一為3A蛋白，被認為是移動蛋白；外鞘蛋白及3A
蛋白各別負責病毒之長距離的移動及細胞間之移。CMV-NT9 RNA3之cDNA序列已完全
解讀，包括24Kd的外鞘蛋白基因及30.7Kd的3A蛋白基因。本實驗中將3A蛋白密碼區
選殖於pUR292 lacZ 3''端以生產3A融合蛋白(3A fusion protein) ，並利用PCR (
polymerase chain reaction)技術，選殖3A基因序列於pET-2c以產生3A完整蛋白，
將此二種蛋白以膠體電泳分離回收，做為免疫兔子的抗原，採得多元抗體(polycl-
onal antibody)，比較此二種抗體，發現抗3A蛋白血清專一性較好。免疫沉澱測試
CMV-NT9 RNAs於兔子網狀血球生體外轉譯產生可沉澱3A蛋白，西方轉漬免疫染色偵
測接種CMV NT9 的菸草萃取液時，須先將菸草進行冷處理，方可偵測得3A蛋白，在
此處理下，發現3A蛋白以含有1﹪ Triton X-100之萃取液萃取時，仍留在沉澱物中
，可知3A蛋白可緊密而穩定的與細胞及膜結合。於接種後24小時會短暫大量的累積
在細胞壁、膜和胞器的部分(membrane-organelle fraction) ，而於接種後72小時
亦即系統性病徵出現時3A蛋白即減少。
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