跳到主要內容

臺灣博碩士論文加值系統

(216.73.216.42) 您好!臺灣時間:2025/10/01 17:06
字體大小: 字級放大   字級縮小   預設字形  
回查詢結果 :::

詳目顯示

我願授權國圖
: 
twitterline
研究生:高麗姬
研究生(外文):Gao, Li-Ji
論文名稱:複式聚合西每連鎖反應在ABO基因型鑑定之研究
論文名稱(外文):ABO Genotyping for Multiplex Polymerase Chain Reaction
指導教授:李俊億李俊億引用關係
指導教授(外文):Li, Zun-Yi
學位類別:碩士
校院名稱:中央警察大學
系所名稱:刑事警察研究所
學門:軍警國防安全學門
學類:警政學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1998
畢業學年度:87
語文別:中文
論文頁數:159
相關次數:
  • 被引用被引用:0
  • 點閱點閱:273
  • 評分評分:
  • 下載下載:0
  • 收藏至我的研究室書目清單書目收藏:0
ABO血型係臨床輸血醫學上最重要血型系統之一,自從1900年由Landsteiner發現以來,即被廣泛應用在親子鑑定、輸血檢驗、人類學研究及刑事鑑定上。以傳統血清學方法鑑驗ABO血型,雖有原理簡單且方法經濟等優點,但於刑事應用上,則常因刑事檢體受到各種因素影響,使得鑑定結果漸受限制。1990年Yamamoto等人選殖出ABO基因位cDNA,並分析出ABO對偶基困之變異現象,正式揭開了人類對ABO基因之神秘面紗,陸續才有學者引進ABO基因型鑑定之相關研究。本研究係針對Yamamoto等人所提出ABO基因位cDNA中之二個主要變異點(第六與七個顯譯子之第261與703個核甘酸)上鹼基差異設計引子對,利用PCR技術分別或同時複製,並配合巢式PCR,因應刑事檢體微量之限制,將 PCR複製出之產物,經由二種方式進行鑑析:一為酵素分解法(RFLP):每次PCP-RFLP反應只要0.5ng以上DNA模板,即可進行分析ABO基因型;如果外環PCR反應之DNA模板量低於0.5ng以下而無法進行RFLP者,則可利用巢式PCR反應,進行內環PCR-RFLP,對於外環PCR-RFLP無法偵測者(0.5-10-2 ngDNA模板所得之PCR產物)所進行內環PCR-RFLP,仍得到正確的結果。一個細胞之DNA含量大約7.14x10-3 ng。事實上,以此最佳實驗條件已對DNA模板用量減至最低,將利於其他DNA遺傳標記之分析。二為非變性聚丙烯醯胺膠電泳暨銀染法(PAGE):利用特定濃度的聚丙烯醯胺膠電泳分析,可將一個鹼基之差異分離及DNA單股構形多型現象(SSCP)的特性,針對260個隨機抽取之中國捐血人進行實驗,發現在此二個DNA複製片段之PAGE分析結果,可歸納成七個PAGE圖譜;而SSCP之分析結果,則可歸納成九個SSCP圖譜。其中AO-BO與00各有二種圖譜,經由定序結果發現主要形成原因係由於有二種不同DNA序列的0對偶基因所造成。本研究建議從ABO基因住以外環引子對分別PCR複製含有二個變異區,將複製所得之PCR產物,進行SSCP分析,可達到九種不同ABO基因型之圖譜,並將國人中最普遍的0型人之亞型加以區分,故以分別複製之PCR-SSCP分析為本研究之最佳ABO基因型分析方法。經與ABO表現型比對結果,吻合率高達98.5% (256/260個樣品),本法提供在傳統血清學方法以外,另一個快速、簡便、且正確的輔助方法。
ABO blood group is clinically the most important blood group system in transfusion medicine including fours common different phenotypes . It has been a valuable tool in transfusion medicine , physical anthropology , disputed parentage testing , human identification , and in forensic analysis . Historically , forensic and clinical labatories utilize serological techniques to identify ABO blood type . The testing of forensic samples for ABO types using serological techniques has several drawbacks . We has simplified the identification of ABO types by taking advantage ofpreviouly reported ABO DNA sequence difference . The use of single strand conformation polymorphism ( SSCP ) can separate sequence polymorphism than differ by only one base . We has investigated in 260 Chinese donors by multiplexed Polymerase Chain Reaction . In this study the ABO alleles from exon 6 , producing a 212/213 bp fragment , and exon 7, which produces a fragment of 272 bp, were separated by non-denaturing polyacrylamide gels. The two exons were amplified in a single reaction that produces similar quantities of DNA for both exons . However , in 260 SSCP patterens we can clustered 9 into different distinct and discernible groups . A concordance rate of 98.5 % (256/260 samples) observed between the actural genotype and the serologically-based predicted genotype . These results indicate that the assay provides a rapid , accurate , and simple method for ABO genotyping that serves as a useful supplement to standard serological ABO typing.
封面
證明書
謝誌
論文提要
目次
第一章 緒論
第一節 研究動機與目的
第二節 ABO血型系統之介紹
第三節 利用聚合西每連鎖反應技術分析ABO基因型之相關文獻回顧
第四節 ABO基因型與傳統血清方法之比較
第二章 實驗材料與方法
第一節 實驗設計
第二節 實驗材料與步驟
第三章 結果與討論
第一節 ABO血型之血清學分析結果
第二節 ABO基因型鑑定之結果
第四章 結論
參考文獻
連結至畢業學校之論文網頁點我開啟連結
註: 此連結為研究生畢業學校所提供,不一定有電子全文可供下載,若連結有誤,請點選上方之〝勘誤回報〞功能,我們會盡快修正,謝謝!
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
第一頁 上一頁 下一頁 最後一頁 top