臺灣博碩士論文加值系統

本研究目的在於建立植酸、甘醇酸、乳酸、蘋果酸與杏仁酸之混酸溶液之分析方法。研究中針對管柱的種類、移動相之種類與組成、移動相之流速等因素。對分析物層析結果之影響進行探討，以找到最適化的分離條件。研究中先對分析物個別分析，找到適當的條件再進行混酸之分析。研究結果發現以Discovery® C18 (250×4.6mm，5μm)為固定相，磷酸緩衝液（pH2）和甲醇之混合溶液（95：5）為移動相，流速為0.5 ml/min時，可得到最佳的分離結果。此方法應可應用之實際樣品之分析。

The aim of this research is to establish a analytical method for the determination of phytic acid , glycolic acid , lactic acid , malic acid and mandelic acid in cosmetics.The following factors were considered in this research；column type , pH buffer and organic modifier in the mobile phase and the flow rate of mobile phase.
The use of Discovery® C18 column as the stationary phase and a mixture of phosphate buffer(pH2 ) and methanol (95: 5) should be a better choice for the determination of phytic acid and fruit acid in cosmetics.
The results could be applied to the determination of phytic acid and fruit acid in real sample.

壹、研究動機 1
貳、研究背景 2
一、美白化粧品之基本要求 2
1.1美白成分遏止黑色素生成之作用機轉（圖2-3）： 4
1.1.1黑色素細胞之破壞作用（Destructive action） 5
1.1.2酪胺酸酵素之活性抑制作用（Coagulating action） 6
1.1.3銅離子的螯合作用（Chelate action） 6
1.1.4 具有遏止黑色素生成作用之美白成份 6
1.1.4.1汞化合物（Mercurous compound） 6
1.1.4.2 對苯二酚(Hydroquinone) 7
1.1.4.3 維他命C (Ascorbic acid) 7
1.1.4.4杜鵑花酸（Azelaic acid） 8
1.1.4.5熊果素（Arbutin） 8
1.1.4.6 桑椹萃取液（Mulberry） 9
1.1.4.7 麴酸(Kojic acid) 9
1.1.4.8 植酸(Phytic acid) 9
1.2美白成分還原黑色素或使其分解剝離之作用機轉 10
1.2.1黑色素之還原作用（Reduction action） 10
1.2.2黑色素之剝離作用 11
1.2.3果酸與其他美白成分之比較 16
二、植酸與果酸之關係 16
三、果酸與植酸的分析 17
3.1果酸之分析方法 17
3.2植酸之分析方法 20
參、實驗藥品 26
肆、實驗儀器 27
伍、實驗設計 27
陸、實驗步驟 28
柒、結果和討論 33
7.1探討植酸，蘋果酸，甘醇酸，乳酸和杏仁酸在利用分離管柱（Hypersil® HSC18）以及不同比例的緩衝溶液和甲醇混合為移動相所得之分離效果。 43
7.1.1甘醇酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 43
7.1.2甘醇酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 45
7.1.3甘醇酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 47
7.1.4甘醇酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 49
7.1.5乳酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 51
7.1.6乳酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 53
7.1.7乳酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 55
7.1.8乳酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 57
7.1.9. 蘋果酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 59
7.1.10蘋果酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 61
7.1.11蘋果酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 63
7.1.12蘋果酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 65
7.1.13杏仁酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 67
7.1.14杏仁酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 69
7.1.15杏仁酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 71
7.1.16杏仁酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 73
7.1.17植酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 75
7.1.18植酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 77
7.1.19植酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 79
7.1.20植酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 81
7.2探討植酸，蘋果酸，甘醇酸，乳酸和杏仁酸在利用分離管柱（Discovery®C18）以及不同比例的緩衝溶液和甲醇混合為移動相所得之分離效果。 84
7.2.1甘醇酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 84
7.2.2甘醇酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 86
7.2.3甘醇酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 88
7.2.4甘醇酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 89
7.2.5乳酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 92
7.2.6乳酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 94
7.2.7乳酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 96
7.2.8乳酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 97
7.2.9蘋果酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 100
7.2.10蘋果酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 102
7.2.11蘋果酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 104
7.2.12蘋果酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 106
7.2.13杏仁酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 108
7.2.14杏仁酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 110
7.2.15杏仁酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 112
7.2.16杏仁酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 114
7.2.17植酸以pH2的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 116
7.2.18植酸以pH7的磷酸緩衝溶液所得之層析結果。 118
7.2.19植酸以pH4的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 120
7.2.20植酸以pH5的檸檬酸緩衝溶液所得之層析結果。 122
7.3流速對於分析物分離效果的影響。 125
捌、結論 140
玖、參考文獻 141
拾、附錄 145





























圖2-1、皮膚表皮層結構圖 3
圖2-2、黑色素生成的反應機制圖11,12 4
圖2-3、美白成分對黑色素之作用方式 5
圖2-4、AHA之結構 13
圖2-5、植酸與礦物質及蛋白質螯合情形 17
圖6-1、實驗流程圖 28
圖7-1、分析物和移動相之紫外光全波長（200-350NM）之吸收 34
圖7-2、果酸和植酸之液相層析圖（移動相：100％磷酸緩衝溶液（PH7））。 36
圖7-3、果酸和植酸之液相層析圖（移動相：100％磷酸緩衝溶液（PH2））。 37
圖7-4、果酸和植酸之液相層析圖（移動相：100％檸檬酸緩衝溶液（PH4））。 39
圖7-5、果酸和植酸之液相層析圖（移動相：100％檸檬酸緩衝溶液（PH5））。 42
圖7-6、甘醇酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 44
圖7-7、甘醇酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 46
圖7-8、甘醇酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 48
圖7-9、甘醇酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 50
圖7-10、乳酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 52
圖7-11、乳酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 54
圖7-12、乳酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 56
圖7-13、乳酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 58
圖7-14、蘋果酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 60
圖7-15、蘋果酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 62
圖7-16、蘋果酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 64
圖7-17、蘋果酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 66
圖7-18、杏仁酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 68
圖7-19、杏仁酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 70
圖7-20、杏仁酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 72
圖7-21、杏仁酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 74
圖7-22、植酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 76
圖7-23、植酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 78
圖7-24、植酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 80
圖7-25、植酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 82
圖7-26、甘醇酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 85
圖7-27、甘醇酸以磷酸緩衝溶液PBS（PH7）和甲醇之液相層析圖 87
圖7-28、甘醇酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 90
圖7-29、甘醇酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 91
圖7-30、乳酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 93
圖7-31、乳酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 95
圖7-32、乳酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 98
圖7-33、乳酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 99
圖7-34、蘋果酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 101
圖7-35、蘋果酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 103
圖7-36、蘋果酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 105
圖7-37、蘋果酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 107
圖7-38、杏仁酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 109
圖7-39、杏仁酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 111
圖7-40、杏仁酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 113
圖7-41、杏仁酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 115
圖7-42、植酸以磷酸緩衝溶液（PH2）和甲醇之液相層析圖 117
圖7-43、植酸以磷酸緩衝溶液（PH7）和甲醇之液相層析圖 119
圖7-44、植酸以檸檬酸緩衝溶液（PH4）和甲醇之液相層析圖 121
圖7-45、植酸以檸檬酸緩衝溶液（PH5）和甲醇之液相層析圖 124
圖7-46、（A）~（E）流速為1.0ML/MIN；（F）~（J）為流速0.5ML/MIN之層析圖。 127
圖7-47、果酸和植酸之液相層析圖（移動相：30％磷酸緩衝溶液（PH2）：70％甲醇當移動相）。 129
圖7-48、果酸和植酸之液相層析圖（移動相：50％磷酸緩衝溶液（PH2）：50％甲醇當移動相）。 130
圖7-49、果酸和植酸之液相層析圖（移動相：70％磷酸緩衝溶液（PH2）：30％甲醇當移動相）。 131
圖7-50、果酸和植酸之液相層析圖（移動相：100％磷酸緩衝溶液（PH2）） 132
圖7-51、植酸與果酸之混酸溶液之液相層析圖。移動相:磷酸緩衝溶液（PH2）: 甲醇＝ 60 : 40(％)。流速:1.0ML/MIN。 134
圖7-52、植酸與果酸之混酸溶液之液相層析圖。移動相:磷酸緩衝溶液（PH2）:甲醇＝ 90 : 10(％)。流速:1.0ML/MIN 。 135
圖7-53、植酸與果酸之混酸溶液之液相層析圖。移動相:磷酸緩衝溶液（PH2）:甲醇＝ 95 : 5(％)。流速:1.0ML/MIN。 136
圖7-54、植酸與果酸之混酸溶液之液相層析圖。移動相:磷酸緩衝溶液（PH2）:甲醇＝ 95 : 5(％)。流速:0.5ML/MIN 。 137
圖7-55、植酸與果酸之混酸溶液之液相層析圖。移動相:磷酸緩衝溶液（PH2）:甲醇＝ 95 : 5(％)。流速:0.5ML/MIN 。 138
圖7-56、樣品之液相層析圖。移動相:磷酸緩衝溶液（PH2）:甲醇＝ 95 : 5(％)。流速:0.5ML/MIN 。 139



表1、FDA對於果酸之分類 12
表2、果酸的成分及來源 12
表3、AHA和植酸之分子量和PKA 15
表4、果酸的種類及其弁鉒S點 15
表5、果酸的濃度及其作用 15
表5、果酸與其他美白成分之優缺點 16
表6、BUFFER SOLUTION和甲醇的體積比（V/V） 31
表7、果酸和植酸分析物利用HYPERSIL HS C18管柱分離時訊號峰滯留時間 83
表8、果酸和植酸分析物利用HYPERSIL HS C18管柱分離時之拖尾現象和多波峰出現的頻率 84
表9、果酸和植酸分析物利用DISCOVERY C18管柱分離時訊號峰之滯留時間 123
表10、果酸和植酸分析物利用DISCOVERY C18管柱分離時之拖尾現象和多波峰出現的頻率 123
表11、利用HYPERSIL HS C18和DISCOVERY C18管柱分析植酸和果酸時的拖尾現象和多波峰出現頻率之比較 128

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