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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:蔡易玲
研究生(外文):Tsai, Yi-Ling
論文名稱:抗Thymidineglycol-BSA單株抗體的製造及特性分析
論文名稱(外文):Propagation and characterization of anti thymidine glycol-BSA monoclonal antibodies
指導教授:高振益高振益引用關係
指導教授(外文):Kao Jung-Yie
學位類別:碩士
校院名稱:國立中興大學
系所名稱:分子生物研究所
學門:生命科學學門
學類:生物科技學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1997
畢業學年度:85
語文別:中文
論文頁數:83
中文關鍵詞:單株抗體免疫分析法融合瘤細胞
外文關鍵詞:monoclonal antibodyELISAThymidine glycolhybridoma
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摘要

當生物體的DNA受到放射或離子化作用後會受到傷害,尤其是當 作用
於腺嘧啶,會形成腺嘧啶環飽和的氧化產物,其中尤以
thymidine glycols (Tgs)最容易形成 。許多生物氧化作用於DNA上 的
研究頗多,如DNA含有Tgs時,會中止DNA的繼續複製。

使用酵素免疫連結吸附法測Tgs的濃度或許可以了解DNA受氧化 的
程度。從被免疫作用過的實驗動物,取脾臟進行細胞融合,利用 間接
型免疫連結吸附法,共獲得六株單株抗體Tg3H11.3, Tg3
H11.9,Tg3H11.14,Tg3H11.17,Tg2D5和Tg2H2;它們對 Tgs-
BSA具很高的親和性,且不會與BSA產生交叉反應;經由
isotyping kit及西方點墨法得知,這些單株抗體產生的免疫球蛋白 均
屬於IgM,k輕鏈。利用競爭型免疫連結吸附法,以Tgs-BSA 當作
抑制物對Tg3H11.17這株細胞進行反應,抑制作用達50 % 時 的濃度
是3.1 pmol,而其它細胞株約15 pmol。以Tgs當抑制劑作 用於Tg3
H11.17細胞株時,抑制作用50 % 時的濃度是9 mmol, 而dT抑制作
用50 % 時的濃度> 50 mmol,表示Tg3H11.17這株細 胞認得的抗原
決定位部分可能位於Tgs-BSA六碳環上的氫氧基、 部分位於
glutaraldehyde與Tgs鍵結的位置。 其它細胞株雖沒有 Tg3H11.17這
細胞株對Tgs專一性高,但是也會辨認Tgs ,且dT 對他們的抑制作
用也很低。

由以上的結果得知抗Tgs-BSA單株抗體對Tgs具專一性,然為了 明
白抗Tgs-BSA單株抗體與Tgs之間的作用關係,所以利用RT- PCR方
法去分析對Tgs最具專一性的單株抗體Tg3H11.17,分析 其重鏈基
因多變異區的胺基酸序列,並與Kabat發表的免疫球蛋白 基因序列比
對,發現此細胞株變異度最大的區域位於CDR上,且 重鏈多變異區
使用的是次群 (subgroup) II A基因。



QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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