臺灣博碩士論文加值系統

台灣草莓二點葉蟎危害猖獗，目前只有化學合成藥劑以供防治，尚無推薦之生物農藥。本研究之目的，為嘗試分離草莓二點葉蟎身體上之蟲生真菌，研究其生物特性及應用作為非農藥防治草莓二點葉蟎資材，以期待能提供一種新的方式來防治二點葉蟎。
自田間採集受到二點葉蟎危害的草莓葉片，在 240 隻蟎體的分離中，共分得白色、淡綠色、灰白色和深綠色等4類菌株，經過初步鑑定，發現白色者為蠟蚧輪枝菌，最似為蟲生真菌。
對各分離株測定其外泌酵素，發現共9分群中之1 至 8 皆可偵測到幾丁質分解酵素之存在，菌落周圍皆出現透明之環狀帶，為膠態幾丁質被分解而呈透明所致。9分群中只有蠟蚧輪枝菌者可偵測到分解蛋白質酵素之存在，菌落周圍出現不透明之環狀帶。9分群中1 至 7 皆可偵測到分解脂質酵素之存在，其菌落周圍出現不透明之環狀帶。
以葉盤法對二點葉蟎進行蟲生真菌之接種，結果顯示純水對照組6天之死亡率為 4 % ，窄域油對照組處理 6 天之殺蟎率為 29 % ，蠟蚧輪枝菌接種者， 6 天殺蟎率平均為 71 % 。而以分群 7木黴菌菌株接種者， 6 天殺蟎率只為 18 %。以分群 8 之淡綠色菌落接種者， 6 天殺蟎率為 9 % 。分群 9 之灰白色菌落接種後， 6 天之殺蟎率為 19 % 。故只有蠟蚧輪枝菌者有比窄域油為佳之殺蟎率
檢查蟲生真菌接種後瀕臨死亡之二點葉蟎身體各部位，發現9分群之代表菌株接種二點葉蟎體表，均可觀察到菌絲存在。但只有分群1至6之蠟蚧輪枝菌可在體內觀察到孢子存在。分群 1 至 6菌株接種二點葉蟎體內可觀察到菌絲及孢子。其餘分群之 7 至 9 則在蟎體內皆未見有菌絲與孢子的存在。接種後進行病原再分離，分群1 至 6之蠟蚧輪枝菌之再分離率為 96 %。分群 7之木黴菌接種後再分離率為 33 %，分群 8 之淡綠色菌落接種後再分離率為 100 % ，分群 9 灰白色菌落接種後再分離率為 56 %。由以上證明分群 1 至 6之蠟蚧輪枝菌具有病原性。
在蟲生真菌之生理特性上，發現分群1之蠟蚧輪枝菌在PDA上，以 25 °C 生長最快，而在 35 °C 生長最慢。於SMAY液態培養基中，產孢量約自2至8日呈對數增加，而至第8天可達 2 X 106 / mL
在蟲生真菌的鑑定上，分群1之菌株(TP13)，經鑑定為蠟蚧輪枝菌 ( Lecanicillium lecanii )，寄主為二點葉蟎，受感染之二點葉蟎常見白色菌絲包覆，其菌絲在體內分布以蟎腹部為多( 90% )，受感染的蟎會停止移動、反應遲緩、足會有不正常之抽動，微觀可見菌體遍及整個血體腔。將此病原真菌分離以PDA培養七天，巨觀菌落呈白色，半圓形略隆起，菌落表面質地緻密，其氣生菌絲白色、絨毛狀，此菌在PDA之背面呈褐黃色，氣味為米糠味。
以紫外線照射蠟蚧輪枝菌誘變育種發現，照射 1 及 2 分鐘者，孢子發芽率均大於 99 % ，照射 3 及 4 分鐘後，孢子發芽率分別為 42 和 16 % ，而照射 5、 7 、 9 及 11 分鐘者，其孢子發芽率均小於 1 %。再以葉盤法進行誘變後蟲生真菌之接種，發現誘變菌株6天之殺蟎率，皆比原菌株TP13者為低，原TP13之6天殺蟎率有71%，而誘變菌株為34 - 46 %。其中11m-2和11m-3之殺蟎率只為34 - 39%，顯著低於其他之菌株。
以蠟蚧輪枝菌對半開放式溫室草莓二點葉蟎進行田間防治試驗，發現6 天後田間二點葉蟎數量降至63 % ，防治率為 53 %。而施用窄域油之對照組，防治率為 49 %。施用純水之防治率為 22 %。

圖目錄 4
表目錄 5
英文摘要 8
第一章 前言 10
一、草莓概說 10
二、台灣草莓栽培現況 11
三、二點葉蟎之非農藥防治現況 12
(一)動物性資材 12
(二)植物性資材 12
四、研究目的 14
第二章 前人研究 15
一、二點葉蟎之生物防治 15
二、二點葉蟎之蟲生真菌 15
三、蟲生真菌防治二點葉蟎之應用 18
四、蠟蚧輪枝菌之應用 19
第三章 材料與方法 20
一、草莓二點葉蟎上蟲生真菌之分離與培養 20
二、蟲生真菌分離菌株對生物基質分解能力之測試 21
(一)蟲生真菌對幾丁質分解能力之測試 22
(二)蟲生真菌對蛋白質分解能力之測試 22
(三)蟲生真菌對脂質分解能力之測試 22
三、蟲生真菌分離株對二點葉蟎之生物測試 24
(一)健康二點葉蟎之飼養及繁殖 24
(二)以葉盤法進行蟲生真菌之接種 24
(三)蟲生真菌對二點葉蟎病原性的確認 26
(四)蠟蚧輪枝菌侵染二點葉蟎各部位之觀察 26
四、二點葉蟎蟲生真菌生理特性之測試 27
(一)蟲生真菌最適生長溫度之測試 27
(二)以SMAY液態培養基測試蟲生真菌產孢之能力 27
五、草莓二點葉蟎上蟲生真菌菌種之鑑定 28
六、蠟蚧輪枝菌的誘變育種實驗 29
(一)以紫外線照射蠟蚧輪枝菌試驗 29
(二) 測試誘變菌株對生物基質之分解能力 29
(三)以葉盤法進行誘變後蟲生真菌之接種 29
七、蠟蚧輪枝菌對半開放式溫室草莓二點葉蟎之田間防治試驗 30
第四章 結果 31
一、草莓二點葉蟎上蟲生真菌之分離與培養 31
二、蟲生真菌分離株對生物基質分解能力之測試 34
(一)蟲生真菌對幾丁質分解能力之測試 34
(二)蟲生真菌對蛋白質分解能力之測試 34
(三)蟲生真菌對脂質分解能力之測試 34
三、蟲生真菌分離株對二點葉蟎之生物測試 39
(一)健康二點葉蟎之飼養 39
(二)以葉盤法進行蟲生真菌之接種 40
(三)蟲生真菌對二點葉蟎病原的確認 42
(四)蠟蚧輪枝菌侵染二點葉蟎各部位之觀察 44
四、二點葉蟎蟲生真菌生理特性之測試 53
(一)蟲生真菌最適生長溫度之測試 53
(二)以SMAY液態培養測試蟲生真菌產孢子之能力 54
五、草莓二點葉蟎上蟲生真菌菌種之鑑定 56
六、蠟蚧輪枝菌的誘變育種實驗 59
(一)以紫外線照射蠟蚧輪枝菌試驗 59
(二) 測試紫外線誘變菌株對生物基質之分解能力 60
(三)以葉盤法進行誘變後蟲生真菌之接種 62
七、蠟蚧輪枝菌對半開放式溫室草莓二點葉蟎之田間防治試驗 63
第五章 討論 64
一、草莓二點葉蟎上蟲生真菌之分離與培養 64
二、蟲生真菌分離株對生物基質分解能力之測試 65
三、蟲生真菌分離株對二點葉蟎之生物測試 66
四、二點葉蟎蟲生真菌生理特性之測試 67
五、草莓二點葉蟎上蟲生真菌菌種之鑑定 68
六、蠟蚧輪枝菌的誘變育種實驗 69
七、蠟蚧輪枝菌對半開放式溫室草莓二點葉蟎之田間防治試驗 70
參考文獻 71

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