|
子宮頸癌為亞洲婦女易於罹患的癌症之一, 本篇研究目的在於探討免疫毒素9.5D-IT
對子宮頸癌細胞生長的影響, 本實驗使用的細胞有三種-SiHa,Me180 為子宮頸癌細胞
, H2669 為黑色素瘤細胞, 將abrin-A chain 與Mab 9.5D以SPDP共價鍵結后, 合成一
免疫毒素9.5D-IT.以4/16 gradient SDS-polyacrylamide gel electrophoresis求出
Mab 9.5D的分子量約為185,000 daltons,而9.5D-IT 的分子量約為240,000 daltons
由此推得每個Mab 9.5D分子可接上2 個abrin-A chain。 利用酵素免疫檢驗(ELISA),
測得9.5D-IT 與癌症細胞SiHa結合之活性較之Mab 9.5D并未顯著下降。以細胞外蛋白
合成轉譯系統試驗, 9.5D-IT 抑制蛋白合成能力與abrin-A chain 并無差異。細胞毒
性是以蛋白合成抑制試驗及存活率來判定。以不同濃度的9.5D-IT,abrin-A chain,Ma
b 9.5D及abrin-A chain 與Mab 9.5D等當量混合物處理4 小時后,9.5D-IT對SiHa的半
抑制劑量(ID )為9×10 M,ME180為8×10 M,H2669為8×10 M, 顯見9.5D-IT 對子
宮頸癌細胞的特異毒性, 以clonogenic assay檢測細胞存活率, 發現於1×10 M 時
為最理想的作用劑量。在此濃度下,SiHa 及ME180 存活率均降至0.1%(3 log) 以下,
而H2669 仍保有60% 以上的存活率。本篇研究結果對子宮頸癌以免疫毒素治療, 提供
了一條可行之路。
|