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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:鄭秋萍
研究生(外文):ZHENG,QIU-PING
論文名稱:製備甘蔗嵌紋病毒之單元抗體應用在系統之鑑別
論文名稱(外文):Preparation of monoclonal antibody for differentiating strains of sugarcane mosaic virus
指導教授:蘇鴻基蘇鴻基引用關係
指導教授(外文):SU,HONG-JI
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:植物病蟲害研究所
學門:農業科學學門
學類:植物保護學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1990
畢業學年度:78
語文別:中文
論文頁數:125
中文關鍵詞:製備甘蔗嵌紋病毒單元抗體系統鑑別間接免疫螢光染免
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具純化之甘蔗嵌紋病毒A, B及D 系統病毒當免疫原,分別注射小白鼠(BALB/O),製備
單元抗體,結果A, B, D 系統各獲得3 株,10株及10株融合瘤細胞初生株系,部份再
經單株化後,各選得3 株,13株及3 株分泌單元抗體之融合瘤細胞單株系。所得之單
元抗體亞型分別屬於IgG2a, IgA, IgM ,其力價在培養上層液中有的可高達4,096 倍
,腹水抽出液可高達32,763,000倍,純化過之抗體有的則濃度為2.5ug/ml時仍可鑑別
病健萃取液,力價極高。所得之單元抗體對A, B, D 系統病毒之反應各有差異,由其
對SCMV-A, B, D及MDMV-B之抗原特異性可分為5 個血清群(Sero-groups) 。其中由D
系統病毒免疫小白鼠而得之8B11A7,屬於V 群,具專一特異性,只與SCMV-D系統病毒
反應而不與A 或B 系統病毒反應,且與D 系統病毒之反應極佳,但與MDMV-B有弱反應
。I 群辨認共同抗原基(Common opltope)對4 個病毒系統均呈等強反應;II及III 群
可對各系統反應,但反應強度有差異;IU群對SCMV之3 個系統之另一共同抗原基呈強
反應,但與MDMV-B不反應。將單元抗體應用於間接免疫瑩光染色法,檢驗健康及感染
有SCMU-A, B, D系統病毒之玉米及甘蔗新鮮組織切片時,發現效果極佳,且所得結果
與ELISA 之結果在質與量上皆相符合。所得單元抗體以其抗腹水抽出液應用在免疫電
子顯微鏡上時,其捕捉及修飾效果皆佳,若以其細胞培養上層液作應用時則具修飾效
果,但捕捉效果不佳。利用分泌單元抗體細胞之培養上層液來測定寄主植物中甘蔗嵌
紋病毒之含量時發現:罹病之玉米及甘蔗萃取液之可測稀釋臨界點可高達20.480倍,
靈敏度度極高:按種40天後玉米中之病毒含量最高,按種後20及60天,病毒含量較低
,且幼葉及成熟葉中病毒之含量為較高,老葉及莖部則較低;甘蔗也以最幼之一、二
葉片病毒含量較高。甘蔗嵌紋病毒增殖之最佳溫度是28℃左右。當探討病毒抗原在微
量盤穴中之塗覆效果時,發現病毒萃取液最佳塗覆效果是在pH值為8.00至8.77時,而
病毒萃取緩衝溶液與涂覆緩衝溶液之比為5:5 或4:6 。

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