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抗生素這類化學物質具有在低濃度下抑制他種微生物體的成長或破壞微生
物體的能力，目前市面上以β－內醯胺類(β－lactam)抗生素居多而在製
造過程中所需的中間產物6-APA在國內產量並不大。探討PAC酵素之純化技
術，並直接利用純化之PAC酵素進行反應來避免反應物質傳之影響，以期
大幅提高利用Penicillin G 製造6-APA之產率。本研究利用大腸桿菌
ATCC11105染色體中的pac基因植株到質體pBR322適當位置上，以製作出
pCLL32系列等含pac基因之質體並轉形植入適當之宿主細胞以來大量製造
PAC酵素,並以超音波震碎機將細胞打破，收集其細胞萃取液，再分別以離
子交換層析(ion exchange chromatography)與凝膠過濾法(gel
filtration)進行PAC酵素之純化。而經Q Sepharose離子交換層析法純化
後﹐再以S-100 Shepharcyl凝膠過濾層析法其PAC酵素比活性可提高至535
倍以上。綜合上述實驗結果，PAC酵素之純化實驗以選用交聯過、耐壓好
之填充劑較為適合，同時配合多段純化處理步驟將有助於酵素反應性、反
應動力學及固定化之研究。本研究並嘗試將該酵素以載體Celite 454進行
固定化，以利於設計生產6-APA之生物程序；本研究評估該固定化酵素之
穩定性及持久性，並探討不同處理型態下之PAC酵素的動力學，及評估可
能之動力模式及參數。
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