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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:蔡金池
研究生(外文):CAI,JIN-CHI
論文名稱:甘蔗白條病菌之生理生化特性輿單元抗體之製備
論文名稱(外文):Characterization and monoclonal antibody production of xanthomonas albilineans (ashby) dowson, the causal agent of sugarcane leaf and scald disease
指導教授:林長平
指導教授(外文):LIN,CHANG-PING
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:植物病蟲害研究所
學門:農業科學學門
學類:植物保護學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1990
畢業學年度:78
語文別:中文
論文頁數:65
中文關鍵詞:甘蔗白條病菌生理生化特性單元抗體製備間接免疫酵素聯結
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本研究之甘蔗白條病病原菌Xanthomonas albilineans (X.a.)分離自本省南部之(ROC
l, ROCll, Fl77) 罹病株等品種,X.albilineans 屬於非典型Xanthomonads, 為不產
生胞子,好氣性,革蘭氏陰性菌,桿狀,單生鞭毛,黃色菌落,具有過氧化氫脫氧酵
素(Catalase)和水解七葉樹(Esculin) 能力,在白明膠(Gelatin) , 澱粉(Starch)水
解,分解牛奶(Milk proteolysis), 尿素(Urease), Arginine, Dihydrolase, Lysin
e,和Ornithine decarboxylase,硫化氫(H S) ,引朵(Indole), OF(oxidation -ferm
entation),硝酸還原(Nitrate pro-duction) 和Voges-Prokauer等測試中皆呈負反應
;無法利用有機酸Tartrate和Benzoate。不能利用天門冬鹼(Asparagine)為唯一碳及
氮源;能夠利用Fructose和Trehalose 產生酸,而僅能生長但不產生酸的碳素源包括
:Arabinose, Cellobiose, Galactase, Glucose, Inulin, Lactose, Mannose,Meli
biose, Raffinose, Sorbi-tol, Sucrose, Xylose, 而不能供生長之碳素源包括Adon
itol, Dulicitol, Inosi-tol, Maltose, Mannitol, Methylglucoside, Rhamnose,
Salicin 等。在14次的獨立的融合瘤細胞製備過程中,得到43個對X.albilineans 有
反應的融合瘤(hybri-doma)株,其中有12株融合瘤產生對X.albilineans 具專一性(s
pecificity) 之單元抗體(monoclonal antibodies, MAS), 且可偵測到5×10 cells
的完全菌體細胞(intact cell) 或等菌量之超音波震碎細胞(sonicated cell), 又其
中MAs 2, 38 更可偵測到5×10 cells 的超音波震碎細胞;MAs 1, 34, 37, 38 等可
偵測到5×10 cells 的完全菌體細胞,在間接式ELISA 抗體力價(titer) 測定中,這
些單元抗體之最大力價 (抗體稀釋倍數) 可達625 倍,而最小為1 倍稀釋。12個具專
一性反應之單元抗體中MAs7, 38屬於IgG3, MAs36, 34 屬於IgG2b,其餘MAs 1, 2, 3,
5, 9, 24, 35, 37, 等8 個單元抗體皆屬於IgG2a 抗體亞型(Isotype) 。12株具有
專一性反應之單元抗體利用間接免疫酵素聯結法應用在病株抽出液偵測,具有反應者
有MAs 1, 3, 9, 34, 35, 36, 38, 等7 株;利用螢光抗體染色技術偵測純粹培養之
菌體細胞,能夠染出整個完整菌體細胞有MAs 1, 2, 3, 34, 37, 38 等6 株,呈現點
狀螢光反應者有MAs 7, 9, 24, 35, 36, 等5 株,同時具有上述兩者特性者僅有MAs
5 。在病株抽出液之螢光抗體染色之反應,則與純粹培養之菌體細胞相同。43個單元
抗體利用墨浸漬法偵測純培養之10 cells/well 完整菌體細胞,具有反應者有29株,
而應用在等菌量之超音波震碎細胞之偵測有28株,皆具有專一性反應之單元抗體僅有
MAs 1, 2, 3, 7, 9,等五株,在添加等菌量完整菌體細胞之墨浸漬法蔗汁偵測上有13
株,具有專一性反應者僅有6 株,而在添加等菌量之超音波震碎細胞之偵測上皆不具
有反應,在病株抽出液具有偵測能力者,僅有MAs 1, 2, 3 等三株單元抗體。

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