臺灣博碩士論文加值系統

中文摘要
人類文明發展至今已經發生許多的傳染病，所以在一般常用的清潔品中會加入一些殺菌或抗菌成分來減少傳染疾病的產生，本研究利用高效液相層析儀(HPLC)，找出最簡單、快速及準確的方法來偵測自製液態皂中的Chlorhexidine gluconate及Chlorhexidine dihydrochloride殺菌成分。
本研究所建立的HPLC分析方法，層析管柱：HYPERSIL ODS-C18（5μm，4.6 mm × 250 mm），移動相為甲醇：1.38%(w/w)磷酸二氫鈉及0.5%(v/v)三乙胺pH值為3的緩衝溶液(68:32)，偵測波為長 259 nm，流速：1.0 ml∕min及注入量為10 μL，在6分鐘內可各別分析出這兩種殺菌劑。在安定性試驗結果中，測試含0.1% Chlorhexidine gluconate及Chlorhexidine dihydrochloride的自製殺菌液態皂，在25℃條件下放至三個月，Chlorhexidine gluconate及Chlorhexidine dihydrochloride含量分別為94.2%及95.3%，可見此殺菌成分在液態皂中的安定性很好。
在本分析方法的確效實驗中，Chlorhexidine gluconate的相對標準偏差介於0.12%～0.61%，回收率為98.9%，線性迴歸R2＝0.9936，偵測極限5.3 ppm，定量極限7.1 ppm；而Chlorhexidine dihydrochloride的相對標準偏差介於0.16%～1.03%，回收率為99.22%，線性迴歸R2 ＝0.9938，偵測極限4.8 ppm，定量極限6.2 ppm。在破壞實驗中不論是加熱、加酸、加鹼、加H2O2及照射UV，對於Chlorhexidine gluconate及Chlorhexidine dihydrochloride的含量都有在90%以上。

Abstract
Many infectious diseases have produced during the development of human civilization. It is very common to add bactericidal or antibacterial ingredients to cleaning products in order to reduce the occurrence of infectious diseases. This research is to develop a simple, fast and accurate HPLC method to analyze these two bactericides of Chlorhexidine gluconate and Chlorhexidine dihydrochloride in the homemade liquid soap.
The developed HPLC method was performed with the conditions: column (Hypersil ODS-C18; 5μm; 4.6 mm × 250 mm), mobile phase(methanol: 1.38%(w/w)NaH2PO4 and 0.5%(v/v)TEA buffer at pH 3 = 68:32), detection wavelength 259 nm, flow rate 1.0 ml/min, injection amount 10 μL, and the run time was within 6 minutes to analyze these two bactericides, individually. In the stability tests, the disinfecting formula of homemade liquid soap showed the satisfied results with the 97.0% contents of Chlorhexidine gluconate and 97.8% contents of Chlorhexidine dihydrochloride, respectively, in three month of 25℃room temperature condition.
In the results of validation experiment, the relative standard deviation (RSD) of Chlorhexidine gluconate is ranged from 0.12% to 0.61%, the average recovery was 98.9%, the linear regression coefficient (R2) was 0.9936, and the limits of detection (LOD) and quantification (LOQ) were 5.3 ppm and 7.1 ppm, respectively. The relative standard deviation of Chlorhexidine dihydrochloride is ranged from 0.16% to 1.03%, the average recovery was 99.22%, the linear regression coefficient was 0.9938, and the limits of detection and quantification were 4.8 ppm and 6.2 ppm, respectively. In the stress experiments of method validation, the contents of Chlorhexidine gluconate and Chlorhexidine dihydrochloride were quite stable and remained more than 90% during the test of heating as well as illuminating UV light and by adding strong acid, strong base and strong oxidant.

目錄
第一章、 緒論 1
一、 簡介 1
(一)、液態皂的歷史 1
(二)、液態皂及香皂的總類 1
(三)、殺菌劑用途 2
(四)、殺菌作用的機制 2
(五)、殺菌劑總類及特性 3
(六)、市售常見抗菌成份調查 4
二、 研究目的 6
三、 殺菌液態皂分析方法 7
(一)、分析儀器 7
(二)、液態皂配方 7
(三)、分析方法 8
第二章、 實驗 9
一、 藥品 9
二、 儀器設備 9
三、 殺菌液態皂成分 10
四、 高效液相層析儀分析條件建立 17
五、 兩種常見抗菌洗手乳殺菌劑成分於一個月25℃下安定性測試 22
六、 殺菌液態香皂的製作 23
七、 溶液的配置 26
(一)、標準品的配製 26
(二)、樣品液的配製 26
(三)、空白試劑的配製 27
八、 高效液相層析儀方法確效 27
(一)、專一性(Specificity) 27
(二)、系統穩定性(System suitability) 28
(三)、精密度(Precision) 28
(四)、校正曲線(Linearity) 29
(五)、準確度(Accuracy) 29
(六)、偵測極限與定量極限 29
(七)、分離因子與理論板數的計算 30
第三章、 結果與討論 31
一、 專一性(Specificity) 31
二、 系統穩定性(System suitability) 41
三、 精密度(Precision) 43
四、 校正曲線(Linearity) 53
五、 準確度(Accuracy) 55
六、 偵測極限(LOD)與定量極限(LOQ) 56
第四章、 結論 58
第五章、 參考文獻 60

表目錄
表1:殺菌劑作用部位及機制 3
表2:常見化妝品中污染的微生物 4
表5：本實驗最適當之HPLC分析條件 21
表6：兩種殺菌劑成分的滯留因子、解析度與理論板數 22
表7:32 ppm殺菌劑在25℃安定性數據 22
表8:行政院衛生署食品藥物管理局限量規範(%)與自製殺菌液態皂含量 23
表9:含0.1% Chlorhexidine gluconate或Chlorhexidine dihydrochloride自製殺菌液態皂配方 24
表10：Chlorhexidine gluconate及Chlorhexidine dihydrochloride標準品與樣品滯留時間 31
表11：破壞性試驗的波峰面積數據 41
表12：系統穩定32 ppmChlorhexidine gluconate六重複注射結果數據 42
表13：系統穩定32 ppmChlorhexidine dihydrochloride六重複注射結果數據 42
表14：Chlorhexidine gluconate標準品次與次間重複性的層析數據表 45
表15：Chlorhexidine dihydrochloride標準品次與次間重複性的層析數據表 45
表16：Chlorhexidine gluconate標準品日與日間再現性第一天的層析數據表 47
表17：Chlorhexidine dihydrochloride標準品日與日間再現性第一天的數據表 48
表18：Chlorhexidine gluconate標準品日與日間再現性第二天的層析數據表 50
表19：Chlorhexidine dihydrochloride標準品日與日間再現性第二天的層析數據表 50
表20：Chlorhexidine gluconate標準品檢量線三重複數據 54
表21：Chlorhexidine dihydrochloride標準品檢量線三重複數據 54
表22：Chlorhexidine gluconate回收率數據 56
表23：Chlorhexidine dihydrochloride回收率數據 56
表24：分析主成分的偵測極限與定量極限 57
表25：分析主成分的容量因子與理論板數 57



 
圖目錄
圖 1、皂化反應式 2
圖2、Chlorhexidine gluconate標準液之UV光譜儀吸收圖 18
圖3、Chlorhexidine dihydrochloride標準液之UV光譜儀吸收圖 18
圖4、32ppm Chlorhexidine gluconate標準液之層析圖譜 19
圖5、32ppm Chlorhexidine dihydrochloride標準液之層析圖譜 19
圖6、解析度示意圖 21
圖7、32 ppm Chlorhexidine gluconate標準品之層析圖譜 31
圖8、32 ppm Chlorhexidine dihydrochloride標準品之層析圖譜 32
圖9、32 ppm Chlorhexidine gluconate樣品之層析圖譜 32
圖10、32 ppm Chlorhexidine dihydrochloride樣品之層析圖譜 32
圖11、Chlorhexidine gluconate標準液之(HPLC-PDA)UV吸收圖 33
圖12、Chlorhexidine dihydrochloride標準液之(HPLC-PDA)UV吸收圖 33
圖13、Chlorhexidine gluconate樣品液(HPLC-PDA)之UV吸收圖 34
圖14、Chlorhexidine dihydrochloride樣品液(HPLC-PDA) 之UV吸收圖 34
圖15、(A)未破壞之Chlorhexidine gluconate樣品液之層析圖譜 35
圖16、(B)未破壞之Chlorhexidine dihydrochloride樣品液之層析圖譜 35
圖17、(C)加熱破壞之Chlorhexidine gluconate樣品液層析圖譜 36
圖18、(D)加熱破壞之Chlorhexidine dihydrochloride樣品液層析圖譜 36
圖19、(E)酸化破壞之Chlorhexidine gluconate樣品液層析圖譜 37
圖20、(F)酸化破壞之Chlorhexidine dihydrochloride樣品液層析圖譜 37
圖21、(G)鹼化破壞之Chlorhexidine gluconate樣品液層析圖譜 38
圖22、(H)鹼化破壞之Chlorhexidine dihydrochloride樣品液層析圖譜 38
圖23、(I)氧化破壞之Chlorhexidine gluconate樣品液層析圖譜 39
圖24、(J)氧化破壞之Chlorhexidine dihydrochloride樣品液層析圖譜 39
圖25、(K)照射破壞之Chlorhexidine gluconate樣品液層析圖譜 40
圖26、(L)照射破壞之Chlorhexidine dihydrochloride樣品液層析圖譜 40
圖27、Chlorhexidine gluconate標準品次與次間重複性之層析圖疊圖 44
圖28、Chlorhexidine dihydrochloride標準品次與次間重複性之層析圖疊圖 44
圖29、Chlorhexidine gluconate標準品日與日間再現性之第一天層析圖疊圖 46
圖30、Chlorhexidine dihydrochloride標準品日與日間再現性之第一天層析圖疊圖 47
圖31、Chlorhexidine gluconate標準品日與日間再現性之第二天層析圖疊圖 49
圖32、Chlorhexidine dihydrochloride標準品日與日間再現性之第二天層析 49
圖33、Chlorhexidine gluconate標準品日與日間再現性之第三天層析圖疊圖 51
圖34、Chlorhexidine dihydrochloride標準品日與日間再現性之第三天層析圖疊圖 52
圖35、Chlorhexidine gluconate標準品三重複注射的檢量線 55
圖36、Chlorhexidine gluconate標準品三重複注射的檢量線 55

1. Blue Aspen Originals,http://www.blueaspenoriginals.org/
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12. 衛生福利部食品藥物管理署