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研究生:廖江川
研究生(外文):Liao Chiang Tsuan
論文名稱:台灣產石松科植物之研究石松科之核酸指紋圖譜
論文名稱(外文):Studies on Lycopodiaceae in Taiwan DNA Fingerprints of Lycopodiaceae Revealed by RAPD Analysis
指導教授:邱泰惠邱泰惠引用關係張賢哲張賢哲引用關係劉邦基
學位類別:博士
校院名稱:中國醫藥學院
系所名稱:中國藥學研究所
學門:醫藥衛生學門
學類:藥學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2001
畢業學年度:89
語文別:中文
論文頁數:135
中文關鍵詞:石松科本草學考察外部形態學檢索表聚合連鎖反應逢機增幅多型性核酸標誌
外文關鍵詞:Lycopodiaceaepentsaologymacromorphalogykeypolymerase chain reactionPCRrandom amplified polymorphic DNARAPD
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摘 要
台灣產石松科植物約有廿三種。 唯相關之基礎研究並不多,為確定其種原以及促進該科植物藥材資源之開發與利用,乃進行本研究。今採得該科植物十九種及金不換巿場品三種,經本草學考察、參考文獻及標本核對,鑑定其學名後,目前獲得如下結論:
1.其學名列記如下:
(1) Lycopodium annotinum Linnaeus 杉葉蔓石松
(2) L. carinatum Desvaux 覆葉石松
(3) L. casuarinoides Spring 木賊葉石松
(4) L. cernuum Linnaeus 筋骨草
(5) L. pseudoclavatum Ching 偽石松
(6) L. japonicum Thunberg ex Murray 日本石松
(7) L. fargesii Herter 銳葉石松
(8) L. fordii Baker 福氏石松
(9) L. multispicatum Wilce 多穗石松
(10) L. yueshanense Kuo 玉山地刷子(偉氏石松 )
(L. wightianum Wallich)
(11)L. obscurum Linnaeus 玉柏
(12)L. phlegmaria Linnaeus 垂枝石松
(13)L. salvinioides (Herter)Tagawa 小垂枝石松
(14)L. squarrosum Forst. 杉葉石松
(15)L. taiwanense Kuo 台灣石松
(16)L. quasipolytrichoides Hayata 反捲葉石松
(17)L. serratum Thunb. 【Huperzia serrata(Thunb.)Trev.】 千層塔
(a)L. serratum Thunberg var. longipetiolatum Spring 長柄千層塔
(b)L. serratum Thunberg var.myriophyllifolium Hayata 阿里山千層塔
(18)L. somae Hayata 相馬氏石松
(19)L. veitchii D. Christ 玉山石松
2.製作檢索表以區別不易辨識或易混淆之本科植物。
3.配合逢機增幅多型性核酸(RAPD)標誌分析,獲得下列各項研究結果:
使用OPB-08、OPB-15、OPD-08、OPD-15、OPE-08、OPE-12、OPE-15、OPW-09
等八個核酸引子進行PCR分析,結果顯示十六種石松科植物之核酸條帶
有其共同性和差異性,若配合形態標誌,該核酸指紋圖譜可作為石松科
植物鑑定之客觀輔助依據。
就外部形態學而言,偽石松(L. pseudoclavatum Ching)和日本石松
(L. japonicum Thunb. ex Murray) 不同,且二者之核酸指紋圖譜
( OPB-15、OPD-08、OPE-08、OPD-15、OPE-12、OPW-09 等六個核酸引子)
亦不同,其核酸條帶之差異性較大,可以區別, 因此台灣產石松似應
有偽石松和日本石松二種。
就外部形態而言,多穗石松(L. multispicatum Wilce)和玉山地刷
子(L. yueshanense Kuo)不同,且二者之核酸指紋圖譜 ( OPB-08、
OPB-15、OPD-08、OPE-08、OPD-15、OPE-12、OPW-09 等七個核酸引子)
亦不同,其核酸條帶之差異性較大,可以區別,因此台灣產地刷子似
應有多穗石松和玉山地刷子二種。
台灣產千層塔(金不換)之種原複雜,然經由本研究之結果初次顯示,
OPE-12和OPD-15二核酸引子將有助於其篩選與分類鑑定之客觀輔助依
據;OPE-12之核酸指紋圖譜顯示,800bp、850bp為台灣產千層塔(十
個不同採集地點)之共同條帶,而OPD-15之核酸指紋圖譜顯示,台灣
產千層塔有長柄千層塔、阿里山千層塔兩種,且長柄千層塔又有A、B
二族群之別。
由OPB-15、OPD-08之核酸指紋圖譜得知,金不換市埸品1、2 之核酸
條帶與台灣產千層塔之核酸條帶差異性較大,二者似乎為不同種之植
物。
OPB-08、OPE-12之核酸指紋圖譜顯示,金不換市埸品3與千層塔(產
於線浸者)之核酸條帶差異性較大,二者似為不同之種類。然市埸品
1、2、3之外觀與台灣產長柄千層塔相似。
DNA Fingerprints of Lycopodiaceae Revealed by RAPD Analysis
Chiang-Tsuan Liao
Graduate Institute of Chinese Pharmaceutical Science
China Medical College*
Abstract
There are about 23 species of Lycopodiaceae in Taiwan. Up to now, we have collected and identified 19
species based on morphological study. They are listed as follows :(1)Lycopodium annotinum Linnaeus (2)
L. carinatm Desvaux (3)L. casuarinoides Spring (4)L. cernuum Linnaeusu(5)L. pseudoclavatum
Ching (6)L. japonicum Thunberg ex Murray(7)L. fargesii Herter(8)L. fordii Baker(9)L. multispicatum
Wilce (10) L. yueshanense Kuo (11) L. obscurum Linnaeus (12)L. phlegmaria Linnaeus (13)
L. salvinioides (Herter) Tagawa (14)L. quasipolytrchoides Hayata (15)L. taiwanense Kuo(16)
L. serratum Thunberg var. longipetiolatum Spring (17) L. serratum Thunberg myriophyllifolium
Hayata (18)L. somae Hayata(19)L. veitchii D. Christ。
The following studies have been performed , through RAPD approach :
1. to discover the polymorphism of Lycopodiaceae and to provide a rapid way to differentiate the
species of Lycopodiaceae by molecular markers, e.g. RAPD.
2. to distinguish the difference between the varieties of Lycopodium serratum L. in Taiwan .
3. to use molecular marker as a new approach for the identification in Chinese Crude Drug
“Jing-bu-huan”.
4. to study if the difference between two species“Shisong”and“Diswa gi”in Taiwan could be
revealed by RAPD markers.
Key words: Lycopodiaceae、 Macromorphology、 Key、 Qiancenta (Lycopodium serratum Thunb.)
Lycopodium serratum Thunb. var. longipetiolatum Spring、L. pseudoclavatum Ching、L. japonicum
Thunberg ex Murray、L. multispicatum Wilce、L. yueshanense Kuo、 PCR ( polymerase chain
reaction)、RAPD(randomly amplified polymorphic DNA).
* No. 91 Hsueh-Shih Road,Taichung 404, Taiwan, R.O.C.
封面
謝辭
目錄
摘要
第一章 緒言
第二章 總論
第一節 石松科之本草文獻概述
第二節 台灣產石松科之藥用植物文獻概述
一、台灣產石松科植物之共同特徵
二、台灣產石松科植物之名錄
三、台灣產石松植物之形態與分布
四、台灣產石松科植植物之科、屬檢索表
五、台灣產石松科植植物之寫生圖
第三節 台灣產石松科植物之生藥文獻概述
第四節 逢機增幅多型性核酸(RAPD)標誌分析與植物分類、鑑定之關係
第三章 台灣產石松科植物之形態標誌
第一節 植物之採集、觀察與市場品調查
第二節 植物之採集、調查研究
一、台灣產十九種石松科植物之學名
二、台灣產石松科植物之彩色圖片
三、台灣產石松科藥材及金不換市場品庂彩色圖片
四、結果和討論
五、台灣產石松科藥材之開發與利用
第三節 台灣產石松科植物之形態標誌
一、相馬氏石松和反捲葉石松之異同點
二、王柏和玉山松之異同點
三、垂枝石松和小垂枝石松之異同點
四、鱗葉石松和銳葉石松之異同點
五、長柄千層塔和阿里山千層塔之異同點
六、長柄千層塔族群A、B之異同點
七、多穗石松和玉山地刷子之異同點
八、偽石松和日本石松之異同點
第四章 逢機增幅多丑性核酸(RAPD)標誌分析實驗
第一節 材料與方法
第二節 實驗結果
一、台灣產石松科植物之核酸引子篩選
適合於本研究之核酸引子及其序列
二、台灣產石松科植物之RAPD標誌分析
三、台灣產相馬氏石松和反捲葉石松之RAPD標誌分析
四、台灣產玉柏和玉山石松之RAPD標誌分析
五、台灣產杉葉石松和反捲葉石松之RAPD標誌分析
六、台灣產千層塔(金不換)之RAPD標誌分析
七、千層塔(金不換)市場品之RAPD標誌分析
八、台灣產石松之RAPD標誌分析
九、台灣產地刷子之RAPD標誌分析
十、台灣產石松科、千層塔及金不換市場品之核酸指紋圖譜
第五章 討論與結論
第一節 討論
第二節 結論
參考文獻
英文摘要
歷年研究成果
參考文獻
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