臺灣博碩士論文加值系統

青春痘的發生主要為毛囊開口處異常角質化造成阻塞、皮脂分泌過多、
毛囊中痤瘡桿菌（Propionibacterium acnes）大量增生釋放酵素、化學趨化
物引發發炎反應。在青春痘的治療上，常以抗生素來抑制痤瘡桿菌生長。
但近年來因抗生素的使用犯濫，導致細菌產生抗藥性的現象日趨嚴重。因
此找尋新的抗菌成份，已成為目前抗痘產品的研發趨勢。
精油的使用已經有相當悠久的歷史，且應用於改善空氣品質、治療呼吸
道疾病或頭痛、鎮靜、美容、抗菌等不同領域。本論文主要利用精油的抗
菌特性，測試其對痤瘡桿菌的抑菌效果，同時也將進行抗發炎活性分析，
評估精油應用於改善青春痘之可行性。
抑菌實驗顯示9 種精油對於痤瘡桿菌具有抑制作用，尤其以白千層精油
的效果最明顯，以培養液稀釋法(Broth dilution method)測試其最小抑制濃度
為0.01%。在植物精油抗發炎活性方面，在低於最小抑菌濃度下，利用酵素
免疫連結吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA)分析人類
單核球細胞株(THP-1)分泌細胞激素IL-8、IL-1β、TNF-?的分泌量。實驗結
果發現檸檬尤加利精油及其水溶性成分可明顯抑制由LPS
(Lipopolysaccharide)或痤瘡桿菌上清液所誘導產生IL-8 的分泌量。茶樹精油
(F)及其水溶性成分可明顯抑制由LPS 誘導產生IL-1β 的分泌量。天竺葵和
茶樹精油(I)及其水溶性成分均可明顯抑制由LPS 誘導產生TNF-?的分泌
量。尤加利精油及其水溶性成分可明顯抑制由痤瘡桿菌上清液誘導產生
IL-1β 的分泌量。綜合本論文研究結果，實驗篩選出的9 種精油於低濃度下，
除對痤瘡桿菌有抑制作用外，有些甚至具有抗發炎活性，是值得開發為「改善青春痘」之保養品。

Propionibacterium acnes (P. acnes) is one of the factors of acne. P. acnes
increase by several orders of magnitude in the environment created by
abnormally keratinization in the sebaceous follicle. The organism produces a
variety of exocellulan enzymes and molecules with chemoattractant activity, and
it has also been shown to stimulate cells of nonspeafic immune system to
produce proinflammatory cytokines which initiate inflammation. Antibiotics
have been widely used to treat the acne in the part. This resulted in the
development of bacterial resistance. Finding new antibiotic components has
become the main purpose in the research of anti-acne.
Essential oils have been applied for many years in different areas, such as
the improvement of air quality, treatment of the disease of respiratory system
and, headache, cosmetology and antibiotic. Based on the antibiotic
characteriseic of essential oil, the aim of the research was to estimate the
potential of essential oils on mending acne condition.
The experiment was divided into two parts. Firstly, we sieved out the
essential oils which exhibited antibiotic properties and found that nine of them
can inhibit the growth of P. acnes, especially Melaleuca cajuputil with
minimum inhibitory concentration of 0.01% by broth dilution method.
Secondly, we estimate the activity of anti-inflammation of essential oils
according to the amounts of IL-8、IL-1β and TNF-?secreted from human
monocyte cell line (THP-1) by ELISA method. It was found that the essential
oil and the water- soluble components from Eucalyptus citriodora can inhibit
the secretion of IL-8 from THP-1 cell induced by LPS and P. acnes suspension.
The essential oils and the water-soluble components of Melaleuca alternifolia
can inhibit the secretion of IL-1β from THP-1 cell induced by LPS. The
essential oils and the water-soluble components of Pelargonium and Melaleuca
alternifolia can inhibit the secretion of TNF-?from THP-1 cell induced by
III
LPS. The essential oil and the water-soluble components of Eucalypus can
inhibit the secretion of IL-1β induced by P. acnes suspension.
In summary nine essential oils in this study had antimicrobial activity
against P. acnes at low concentration. In addition, some of them showed the
ability of anti-inflammation. Therefore, these essential oils in this study are
potential to be formulated in skin cane products of mending acne.
Keywords：Acne、Propionibacterium acnes、Essential oil、Minimum
inhibitory concentration、Anti-inflammation

中文摘要… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … Ⅰ
英文摘要… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … Ⅱ
誌謝… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … Ⅳ
目錄… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … Ⅴ
表目錄… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … Ⅷ
圖目錄… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … Ⅸ
第一章緒論
1-1 前言… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1
1-2研究動機… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 2
1-3研究目的… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 3
第二章文獻回顧
2-1 皮膚介紹… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 4
2-1-1表皮… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 5
2-1-2皮脂腺… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 7
2-1-3汗腺… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 8
2-2 痤瘡桿菌介紹… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 8
2-3 痤瘡發生原因… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 10
2-4 痤瘡的治療方法… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 16
2-5 精油歷史與應用… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 18
2-6 精油的分離方法… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 19
2-7 精油成分及抗菌活性… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 20
2-8 精油的分離與鑑定… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 21
VI
第三章實驗材料與方法
3-1儀器設備… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ... 22
3-2菌種與細胞… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ... 23
3-3藥品… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ... 23
3-4 精油來源… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … . 24
3-5 實驗方法… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ... 25
3-5-1 精油的萃取… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … . 25
3-5-2 精油水溶液來源… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .. 25
3-5-3 培養液及培養基之製備… … … … … … … … K … … … … … … … … … .. 26
3-5-4菌種活化與保存… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 28
3-5-4-1新購入凍乾狀態菌株之活化及保存… … … … … … … … … … … … … . 28
3-5-4-2冷凍狀態菌株之活化… … … … … … … … … … … … … … … … … … … . 28
3-5-5人類單核球細胞THP-1 之培養… … … … … … … … … … … … … … … ... 29
3-5-6 刺激物處理… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 30
3-5-6-1 精油對痤瘡桿菌產生刺激物誘導THP-1 細胞分泌IL-8、IL-1β 及
TNF-?之影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 30
3-5-6-2 精油及其水溶性成分對於LPS 或痤瘡桿菌產生刺激物誘導THP-1
細胞分泌IL-8、IL-1β 及TNF-?之影響… … … … … … … … … … … 30
3-5-7抗菌活性測試… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 31
3-5-8細胞存活率測定(MTT assay)… … … … … … … … … … … … … … … … ... 32
3-5-9 抗發炎活性測試… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 33
3-5-9-1 藥品配製… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 33
3-5-9-2 標準品配製… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 34
3-5-9-3 標準曲線製作… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 34
3-5-9-4細胞激素分泌量測試… … … … … … … … … … … … … … … … … … … 35
3-5-10 統計學分析… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 35
VII
第四章研究結果與討論
4-1 精油產率… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 36
4-2 精油的抑菌能力… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 37
4-3細胞存活率… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 47
4-4 精油抗發炎活性評估… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 51
4-4-1 痤瘡桿菌於不同時間所分泌的刺激物對THP-1 之影響… … … … … … 53
4-4-2 精油乳化液Sub-MIC 先處理痤瘡桿菌後所產生刺激物對THP-1 之
影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 55
4-4-3 精油及其水溶性成分對於由LPS 或痤瘡桿菌上清液刺激THP-1 之
響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 59
第五章、結論與未來發展… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 73
參考文獻… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 75
表目錄
表一、水蒸汽蒸餾法所萃取精油的產率… … … … … … … … … … … … … … 36
表二、以圓盤濾紙擴散法評估20%精油的抑菌圈大小(mm)… … … … … … 39
表三、以圓盤濾紙擴散法評估15%精油濃度抑菌圈大小(mm)… … … … ... 40
表四、以圓盤濾紙擴散法評估10%精油濃度抑菌圈大小(mm)… … … … ... 41
表五、以圓盤濾紙擴散法評估5%精油濃度抑菌圈大小(mm)… … … … … . 42
表六、培養基稀釋法分析不同精油的最小抑菌濃度(MIC%)… … … … … . 44
表七、培養液稀釋法分析不同精油的最小抑菌濃度(MIC%)… … … … … .. 46
表八、天竺葵、樟樹、白千層及檜木精油對THP-1 細胞存活率之影響… 48
表九、尤加利、茶樹(T)、茶樹(G)、檸檬尤加利及茶樹(I)精油對THP-1細
胞存活率之影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 48
表十、精油乳化液Sub-MIC 濃度… … … … … … … … … … … … … … … … … 49
表十一、刺激物對THP-1細胞存活率之影響… … … … … … … … … … … … … 50
表十二、痤瘡桿菌於不同時間所產生的刺激物對於THP-1 細胞分泌細胞
激素之影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 53
圖目錄
圖一、皮膚解剖圖… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 4
圖二、痤瘡桿菌之形狀… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 9
圖三、痤瘡桿菌放大形狀… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 9
圖四、毛囊免疫染色解剖圖… … … … … … … … … … … … … … … … … … … 12
圖五、粉刺形成過程… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 13
圖六、三酸甘油酯被水解成游離脂肪酸… … … … … … … … … … … … … … 14
圖七、IL-1β 稀釋標準品檢量線… … … … … … … … … … … … … … … … … 51
圖八、IL-8 稀釋標準品檢量線… … … … … … K … … … … … … … … … … … 52
圖九、TNF-?稀釋標準品檢量線… … … … … … … … … … … … … … … … … 52
圖十、痤瘡桿菌於不同時間所分泌的刺激物對於THP-1 細胞分泌細胞激
素之影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 54
圖十一、精油對痤瘡桿菌產生刺激物誘導THP-1 細胞分泌IL-1β 之影響56
圖十二、精油對痤瘡桿菌產生刺激物誘導THP-1 細胞分泌TNF-?之影響57
圖十三、精油對痤瘡桿菌產生刺激物誘導THP-1 細胞分泌IL-8 之影響.. 58
圖十四、精油對於由LPS 刺激THP-1 細胞分泌IL-1β 之影響… … … … … 60
圖十五、水溶性成分對於由LPS 刺激THP-1 細胞分泌IL-1β 之影響… … 61
圖十六、精油對於由痤瘡桿菌上清液刺激THP-1 細胞分泌IL-1β 之影響… 62
圖十七、水溶性成分對於由痤瘡桿菌上清液刺激THP-1 細胞分泌IL-1β
之影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 63
圖十八、精油對於由LPS 刺激THP-1 細胞分泌TNF-?之影響… … … …
64
圖十九、水溶性成分對於由LPS 刺激THP-1 細胞分泌TNF-?之影響… … 65
圖二十、精油對於由痤瘡桿菌上清液刺激THP-1 細胞分泌TNF-?之
影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 66
圖二十一、水溶性成分對於由痤瘡桿菌上清液刺激THP-1 細胞分泌
TNF-?之影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 67
圖二十二、精油對於由LPS 刺激THP-1 細胞分泌IL-8 之影響… … … … … 68
圖二十三、水溶性成分對於由LPS 刺激THP-1 細胞分泌IL-8 之影響… … 69
圖二十四、精油對於由痤瘡桿菌上清液刺激THP-1 細胞分泌IL-8 之
影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 71
圖二十五、水溶性成分對於由痤瘡桿菌上清液刺激THP-1 細胞分泌IL-8
之影響… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 72

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