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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:張培柔
研究生(外文):Pei-Rou Chang
論文名稱:貫眾與本貫眾之鑑別及品質評估
論文名稱(外文):Identification and Quality Control of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma and Cyatheae Caulis
指導教授:彭文煌彭文煌引用關係
指導教授(外文):Wen-Huang Peng
學位類別:碩士
校院名稱:中國醫藥大學
系所名稱:中國藥學暨中藥資源學系碩士班
學門:醫藥衛生學門
學類:藥學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2015
畢業學年度:103
語文別:中文
論文頁數:155
中文關鍵詞:貫眾綿馬貫眾本貫眾筆筒樹易混淆鑑別品質管制
外文關鍵詞:Dryopteridis Crassirhizomatis RhizomaCyatheae CaulisMisuseIdentificationQuality Control
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貫眾(綿馬貫眾)為鱗毛蕨科(Dryopteridaceae)植物粗莖鱗毛蕨Dryopteris crassirhizoma Nakai帶葉柄殘基之乾燥根莖,有驅蟲,止血,清熱解毒的功能;本貫眾為桫欏科(Cyatheaceae)植物筆筒樹Cyathea lepifera (J. Sm.) Copel.之乾燥莖。本貫眾因和綿馬貫眾之標示易於搞混,為利於區分,本論文之本貫眾皆以其原植物名筆筒樹標示。
經初步調查發現目前臺灣市售貫眾藥材,有誤用與混用之情形。為確保臨床用藥的安全有效,本研究赴臺灣北中南各地中藥行及大盤商收集綿馬貫眾及筆筒樹藥材各十批,進行藥材之外觀性狀鑑別、品質管制(顯微鑑別、化學規格、薄層層析、高效液相層析)、活性測試(抗氧化活性評估、抗氧化成分含量)、安全性(農藥殘留、黃麴毒素)等實驗。
實驗結果發現,在藥材外觀方面,綿馬貫眾飲片多被有葉柄殘基,有黃白色維管束環狀排列。筆筒樹飲片維管束長條形,兩側有紅棕色厚壁細胞組成之環帶;粉末鑑別,只有綿馬貫眾有間隙腺毛;高效液相層析指標成分測定,綿馬貫眾含有白綿馬素AA(Albaspidin AA)及東北貫眾素(Dryocrassin)成分,無去甲氧基莢果蕨素(Desmethoxymatteucinol)成分,筆筒樹則三種成分都沒有;但因東北貫眾素(Dryocrassin)化學結構不穩定,所以只針對綿馬貫眾之白綿馬素AA(Albaspidin AA)進行薄層層析測試及高效液相層析含量測定;活性測試,綿馬貫眾之抗氧化活性和成分含量皆較好;安全性評估檢測中,綿馬貫眾及筆筒樹均無檢驗出黃麴毒素,但於農藥殘留檢測中,綿馬貫眾和筆筒樹皆有農藥殘留,但僅有一批綿馬貫眾藥材不符合各國藥典所訂定的規範。
藉由本研究,可瞭解臺灣市售貫眾藥材及混用藥材本貫眾(筆筒樹)之基原及品質差異性,以此作為鑑別貫眾藥材品質評估之參考。

Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma is the dried rhizome and frond
bases of Dryopteris crassirhizoma Nakai (Dryopteridaceae) with the function
of deworming, stop bleeding, clearing heat and resolving toxin.
After a preliminary investigation, it was found that there is a misuse of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma in Taiwan market. Cyatheae Caulis is the dried stem of Cyathea lepifera (J. Sm.) Copel. (Cyatheaceae). Dryopteridi Crassirhizomatis Rhizoma’s Chinese name is “Mianmaguanzhong”, which is similar to Cyatheae Caulis’s Chinese name “Benguanzhong”, in order to differentiate them, this study will generally call Cyatheae Caulis as “Bitongshu”.
After a preliminary investigation, it was found that there is a misuse of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma in Taiwan market. To ensure the safety and effectivity of clinical drug use, ten samples of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma and Cyatheae Caulis collected from the Chinese herbal medicine shop and wholesaler all over Taiwan have been studied in this research, respectively.
The experiments including morphological features, quality controls (microscopic identification, thin-layer chromatography and high performance liquid chromatography), biological activities assessments (DPPH free radical scavenging activity, total polyphenol, total flavonoid contents and determination of reducing power) and safety assessments (aflatoxins and organochlorine pesticide residue tests) were carried out.
From the experimental result of morphological features, it was found that most of the Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma was surrounded by petiole residues with yellow and white vascular bundles in circular permutation, while Cyatheae Caulis had elongated vascular bundles with annulus that formed by reddish brown thick-walled cells on the both sides. For the microscopic identification, only Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma had numerous intercellular glandular hairs. For the high performance liquid chromatography, apart from Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma had the components of Albaspidin AA and Dryocrassin while Desmethoxymatteucinol did not. Because of the unstable chemical structure of Dryocrassin, this study only focused on the content determination of Albaspidin AA by thin-layer chromatography and high performance liquid chromatography. In addition, Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma exhibited a better anti-oxidative activities than that of Cyatheae Caulis. For the safety tests, none of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma and Cyatheae Caulis had aflatoxins. Although both of them contained some pesticide residue, only one sample of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma was out of the pharmacopeia limit.
In conclusion, this study can be used as the reference for the authentication and quality evaluation of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma and Cyatheae Caulis.

目錄............................................ I
圖目錄.......................................... IX
表目錄.......................................... XIII
摘要............................................ XV
Abstract....................................... XVII
第一章 緒論...................................... 1
第二章 總論...................................... 3
第一節 本草考察.................................. 3
一、歷代本草所撰之原文............................ 3
二、貫眾本草系統圖................................ 14
三、貫眾之性味與歸經考證.......................... 15
四、貫眾之功能與主治考證.......................... 15
五、品種考證..................................... 15
第二節 文獻考察.................................. 19
一、植物分類學................................... 19
二、植物學考察................................... 24
三、指標成分考察................................. 29
四、藥理活性考察................................. 31
第三章 研究材料、方法............................. 34
第一節 材料收集.................................. 34
一、綿馬貫眾(Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma) ................................................34
二、筆筒樹(Cyatheae Caulis).................... 34
第二節 藥材顯微鑑別............................... 35
一、藥材組織顯微鑑別.............................. 35
二、藥材粉末顯微鑑別.............................. 37
第三節 化學規格測定............................... 39
一、化學試劑..................................... 39
二、試劑配製..................................... 39
三、實驗儀器..................................... 39
四、實驗方法..................................... 40
第四節 薄層層析鑑別............................... 43
一、化學試劑..................................... 43
二、實驗儀器..................................... 43
三、檢品溶液..................................... 43
四、對照標準品溶液................................ 44
五、展開劑配製................................... 44
六、展開條件..................................... 45
七、顯色與檢視................................... 45
第五節 東北貫眾素及去甲氧基莢果蕨素之高效液相層析.... 46
一、化學試劑..................................... 46
二、試劑配製..................................... 46
三、實驗儀器及層析管柱............................ 47
四、檢品溶液配製................................. 47
五、對照標準品溶液配製............................ 47
六、分析條件..................................... 48
第六節 白綿馬素高效液相層析之含量測定............... 50
一、化學試劑..................................... 50
二、試劑配製..................................... 50
三、實驗儀器及層析管柱............................ 50
四、萃取次數考察................................. 51
五、檢品溶液配製................................. 51
六、對照標準品溶液配製............................ 51
七、測定法....................................... 52
八、檢量線....................................... 52
九、精密度試驗................................... 52
十、重複性試驗................................... 53
十一、穩定性試驗................................. 53
十二、偵測極限與定量極限試驗....................... 53
十三、添加回收率試驗.............................. 54
十四、分析條件................................... 54
十五、臺灣市售貫眾含量測定........................ 55
十六、綿馬貫眾及筆筒樹檢品指紋圖譜分析條件.......... 56
第七節 抗氧化活性評估............................. 57
一、化學試劑..................................... 57
二、實驗儀器及器材................................ 57
三、實驗方法..................................... 58
第八節 抗氧化成分含量............................. 61
一、化學試劑..................................... 61
二、實驗儀器及器材................................ 61
三、實驗方法..................................... 62
第九節 農藥殘留檢驗............................... 64
一、化學試劑..................................... 64
二、實驗儀器及器材................................ 64
三、實驗方法..................................... 66
四、有機氯農藥標準品檢量線之製備................... 69
第十節 黃麴毒素檢驗............................... 71
一、化學試劑..................................... 71
二、實驗儀器及器材................................ 71
三、實驗方法..................................... 72
第四章 結果...................................... 74
第一節 性狀鑑別.................................. 74
一、綿馬貫眾之性狀鑑別............................ 74
二、筆筒樹之性狀鑑別.............................. 75
第二節 藥材組織顯微鑑別........................... 76
一、綿馬貫眾之組織顯微鑑別........................ 76
二、筆筒樹之組織顯微鑑別.......................... 77
第三節 藥材粉末顯微鑑別........................... 81
一、綿馬貫眾之粉末顯微鑑別........................ 81
二、筆筒樹之粉末顯微鑑別.......................... 81
三、綿馬貫眾及筆筒樹顯微鑑別...................... 82
第四節 化學規格測定.............................. 85
一、臺灣、大陸、香港化學規格規範................... 85
二、綿馬貫眾及筆筒樹檢品五項試驗平均值.............. 86
三、十批檢品五項試驗數據.......................... 87
第五節 薄層層析鑑別.............................. 89
一、萃法選擇及濃度測試............................ 89
二、綿馬貫眾溶媒系統選擇.......................... 90
三、觀察方式選擇................................. 93
四、樣品檢測..................................... 95
第六節 東北貫眾素及去甲氧基莢果蕨素之高效液相層析.... 100
一、東北貫眾素(Dryocrassin)..................... 100
二、去甲氧基莢果蕨素(Desmethoxymatteucinol)..... 104
三、東北貫眾素(Dryocrassin)及去甲氧基莢果蕨素(Desmethoxymatteucinol)UV吸收圖譜.............. 106
第七節 白綿馬素高效液相層析之含量測定............... 107
一、標準品白綿馬素AA(Albaspidin AA)之HPLC層析.... 107
二、標準品白綿馬素AA(Albaspidin AA)UV吸收圖譜.... 107
三、市售貫眾檢品之HPLC層析........................ 108
四、萃取次數考察................................. 109
五、標準品白綿馬素AA(Albaspidin AA)檢量線........ 109
六、綿馬貫眾檢品重複性與精密度試驗................. 110
七、綿馬貫眾檢品穩定性試驗........................ 111
八、偵測極限與定量極限試驗........................ 111
九、綿馬貫眾檢品添加回收率試驗..................... 112
十、綿馬貫眾檢品含量測定.......................... 112
十一、綿馬貫眾及筆筒樹檢品指紋圖譜................. 113
第八節 抗氧化活性評估............................. 117
一、各藥材之萃取率 ................................117
二、DPPH自由基清除能力............................ 117
三、總抗氧化能力測定.............................. 118
四、還原能力測定................................. 120
第九節 抗氧化成分含量............................. 122
一、標準品檢量線................................. 122
二、抗氧化成分含量結果............................ 123
第十節 農藥殘留檢驗............................... 124
一、標準品檢量線................................. 124
二、有機氯農藥標準品滯留時間....................... 125
三、各國藥典中有機氯農藥殘留限量標準................ 126
四、綿馬貫眾及筆筒樹有機氯農藥殘留量................ 128
第十一節 黃麴毒素檢驗............................. 133
一、黃麴毒素標準品B1、B2、G1、G2之HPLC層析......... 133
二、黃麴毒素標準品B1、B2、G1、G2檢量線............. 134
三、檢品黃麴毒素含量.............................. 137
四、各藥材黃麴毒素添加回收率....................... 139
第五章 討論...................................... 140
一、藥材外觀鑑別................................. 140
二、品質管制..................................... 141
三、活性測試..................................... 145
四、安全性評估................................... 145
第六章 結論...................................... 147
第七章 參考文獻.................................. 149

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