臺灣博碩士論文加值系統

本實驗利用高效液相層析（High Performance Liquid Chromatography）來分析生長17 至28 月齡牛樟芝子實體的成份變化，並使用人類肺腺癌細胞（A549 cells）、人類前列腺癌細胞（DU-145 cells）及小鼠黑色素瘤細胞（B16-F10 cells）做癌細胞存活率測試。研究結果顯示，牛樟芝子實體的成份會隨著時間的增加而複雜化，牛樟木中的黃樟素（safrole）並未在牛樟芝子實體上發現。癌細胞存活率測試方面，對A549 cells 作用24 小時，以生長22 月齡的牛樟芝子實體的抑制效果最好，其IC50 為398.7 ± 13.2 μg/mL，對A549 cells 作用48 小時，以生長22、23 及28 月齡的牛樟芝子實體的抑制效果最好，其IC50 < 100 μg/mL；對DU-145 cells 作用48 小時，以生長18 月齡的牛樟芝子實體的抑制效果最好，其IC50 為460.2 ± 6.2 μg/mL；對B16-F10 cells 作用48 小時，以生長20 月齡的牛樟芝子實體的抑制效果最好，其IC50 為380.1 ± 17.2 μg/mL。

中文摘要....................I
ABSTRACT....................II
圖目錄....................VII
表目錄....................XII
第一章 緒論....................1
1.1 前言....................1
第二章 文獻探討....................2
2.1 牛樟芝簡介....................2
2.1.1 牛樟芝的分類地位....................2
2.1.2 牛樟芝的命名....................3
2.1.3 牛樟芝的特徵....................3
2.1.4 牛樟樹與牛樟芝的關係....................4
2.2 牛樟芝的成份分析....................5
2.2.1 組成成份....................5
2.2.2 活性成份....................5
2.2.2.1 多醣體....................5
2.2.2.1 三萜類....................6
2.2.2.2.1 Antcin A....................7
2.2.2.2.2 Antcin B（Zhankuic acid A）和Methylantcinate B....................8
2.2.2.2.3 Zhankuic acid B、Zhankuic acid C、Antcin K....................8
2.2.2.2.4 Antrocamphin A....................9
2.3 牛樟芝的功效....................10
2.3.1 保護肝臟功能....................10
2.3.2 抗腫瘤....................10
2.3.3 抑制細菌及抗發炎....................10
2.3.4 抗氧化....................11
2.3.5 調節免疫力....................12
2.4 黃樟素....................12
第三章 實驗目的與架構....................13
3.1 實驗目的....................13
3.2 實驗架構....................14
第四章 實驗材料與方法....................15
4.1 實驗材料....................15
4.1.1 牛樟芝樣品....................15
4.1.2 細胞株....................17
4.1.3 細胞培養基....................17
4.1.4 實驗儀器設備....................18
4.1.5 實驗藥品....................19
4.2 實驗方法....................20
4.2.1 不同生長月齡牛樟芝樣品前處理....................20
4.2.2 高效液相層析分析方法（High Pressure Liquid Chromatography, HPLC）....................20
4.2.2.1 HPLC 原理....................20
4.2.2.2 HPLC 分析....................21
4.2.3 細胞培養....................23
4.2.3.1 細胞培養條件....................23
4.2.3.2 細胞繼代培養....................23
4.2.3.3 細胞株保存....................23
4.2.3.4 細胞株解凍....................24
4.2.3.5 細胞計數....................24
4.2.4 癌細胞存活率試驗（MTT Assay）....................24
4.2.4.1 MTT Assay 原理....................24
4.2.4.2 MTT Assay 操作步驟....................25
第五章 結果與討論....................26
5.1 HPLC 成份分析....................26
5.1.1 不同生長月齡牛樟芝子實體乙醇萃取液之HPLC 成份分析....................26
5.1.2 牛樟木、香樟木中黃樟素之HPLC 分析....................33
5.2 不同生長月齡牛樟芝子實體之癌細胞存活率試驗....................35
5.2.1 不同月齡牛樟芝萃取液對A-549 cells 之影響....................35
5.2.2 不同月齡牛樟芝萃取液對DU-145 cells 之影響....................43
5.2.3 不同月齡牛樟芝萃取液對B16-F10 cells 之影響....................51
第六章 結論....................59
第七章 參考文獻....................61

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