臺灣博碩士論文加值系統

中文摘要　　有毒之海洋生物，往往含有豐富的化學物質或毒素，這此物
質常具有抗腫瘤、抗癌、抗病毒、抗菌、抗發炎等生理活性、具有被開發
作為天然藥物資源的潛力。 scratcher 為芋螺所分泌的毒素之一，它
的作用接受體尚未被證實，主要症狀為使實驗動物產生搔癢現象。本身為
一段含有 29 氨基酸的 peptide ，其中包括4 個半胱氨酸，可形成2個雙
硫鍵，此外，也包括一個轉譯後修飾的氨基酸--carboxyglutamate(Gla)
且碳端出現的醯胺化(amidation)現象。 實驗上，我們利用合成方式
製造這一段peptide ，並利用高效液相層析法加以純化。經由質譜鑑定分
子量無誤，確定為還原態scratcher 。接著在以Tris buffer 為鹼性環境
下進行大氣氧化。在氧化過程中我們發現幾乎以某種特定雙硫鍵鍵結方式
為主(可能為[12-25;16-27]或[12-27;16-25])。且在CD實驗中發現將近30
％螺旋性。此外，我們亦用不同濃度的GudHCl 去探討Scratcher之其他他
特性。最後分別在以水及氘為溶液進行不同的核磁共振實驗 (TOCSY、
NOESY及 DQF-COSY) ，並根據NOESY光譜所得到的距離限制，配合分子模
擬 軟體加以分析計算，以解出最可能的結構。而最終結果我們發現在
Phe7至Ile20形成一穩定之螺旋結構。

Abstract Many marine organisms usually secrete chemical
compounds and toxins,which posses antitumor, antiviral,
antibacterial, antinflammatoryactivities. The toxins are
therefore candidates for drugs. Scratcher is a kind of venom
secreted by cone snail. Thebiochemical property of scratcher is
still uncertain, but the amino acidsequence and the symptoms of
scratch toxicity in animal test are known.Scratcher is a small
peptide, composed of 29 amino acid residues, andcontains 4
cysteines, forming two disulfide bonds. Scratcher also
containsa carboxyglutamic acid and amidation at C-terminal,
which are rare post-translational modifications. We
synthesized and purified scratcher and checked the
molecularweight by Mass spectroscopy. After oxidation
reactions, we found onemajor product which may be some disulfide
bond patterns ([12-27;16-25]or [12-25;16-27]). Our CD data
indicated that the structure of scratcher iscomposed of 30%
helicity. We also determined the solution structure of
scratcher in water, using a combination of NMR data and
distancegeometry calculation. The NMR data corroborates our CD
data: we observed a characteristic a-helical conformation in the
sequence region ofPhe7-Ile20.