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研究生:陳金珠
研究生(外文):Chen, Jin-Zhu
論文名稱:眼鏡蛇毒磷脂脢A2之免疫化學研究
指導教授:張均昌
指導教授(外文):Zhang, Jun-Chang
學位類別:碩士
校院名稱:高雄醫學大學
系所名稱:熱帶醫學研究所
學門:醫藥衛生學門
學類:醫學學類
論文種類:學術論文
畢業學年度:69
語文別:中文
中文關鍵詞:眼鏡蛇毒磷脂脢A2免疫化學研究醫學熱帶醫學
外文關鍵詞:MEDICINETROPICAL-MEDICINE
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利用CM-Sephadex 及DEAE-Cellulose管注層析法,從眼鏡蛇(Naja naja atra)毒
中分離出來之磷脂 A (Phospholipase A) ,以聚丙烯醯胺膠電泳法及免疫電泳
法證明它為單一的蛋白質。
磷脂 A 分子中只含有一個組織胺酸(Histidine)殘基,利用P-Bromophenacyl
bromide 修飾時,酵素活性幾乎完全消失,但它的抗原性不受影響。鈣離子對此失
活作用具有保護效果。另外,其分子中之三個色胺酸(Tryptophan)殘基以HNB-
bromide 修飾後,酵素活性並沒有顯著的降低,而且與抗體反應的能力仍然保持完
整。從這些結果得知,磷脂 A 分子中唯一的組織胺酸殘基可能為其酵素活性基,
但它與色胺酸殘基一樣,均與抗原決定基無密切的關係。
以磷脂 A 免疫家兔得到的抗血清,利用硫胺分劃法及親和層析法(Affinity
Chromatography)精製出來的純化抗體,以木瓜 (papuin)消化後,利用磷脂
A -Sepharose管柱做親和層析以及膠過濾,可分離出Fab 單價抗體。這些抗體製品
都可以完全抑制磷脂 A 之活性,但雙價抗體之抑制作用比單價抗體較強。
測定單價抗體Fab 與磷脂 A 反應所形成之可溶性複合物的分子量,以及分析磷脂
A 與IgG 定量沈澱反應的結果,得知磷脂 A 分子中具有三個抗原決定基。
#2811868
#2811868

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