胺基酸如丙胺酸、纈胺酸、白胺酸、異白胺酸、脯胺酸、苯丙胺酸、色胺酸、甲硫 胺酸、和銅(Ⅱ)生成胺基酸-銅錯合物,以高效液相層析儀分離錯合物,藉偵測 器(波長254nm )偵測錯合物中銅(Ⅱ),或錯合物在可見光部份有強吸收之特性 (以波長680nm )偵測,鑑定胺基酸,不需將胺基酸以衍生物或破壞性方法偵測之 。 高效液相層析儀條件:移動相THF:HO (0.01 MKHPO) 8:2 (V/V) ,管柱μ﹣ Bondapak-NH ,流速1 cmmin﹣,偵測波長680nm。因立體效應關係使配位基 支鏈越大者其滯留時間越短。溶離次序苯丙胺基>白胺酸∼異白胺酸>纈胺酸>脯 胺酸∼丙胺酸∼甘胺酸。 ▔ ▔ ▔ 以濾紙層析法和薄膜層析法做展開劑選擇實驗,發現THF:HO (0.01 MKHPO 以稀HPO調PH值)8:2 (V/V)為佳。PH值變化對Rf 值無甚大關係。 因二配位基胺基酸,其二個官能基-NH,-COOH,鉗合銅(Ⅱ)降低其特性, 配位基支鏈脂肪性顯示錯合物之Rf 值較未鉗合胺基酸為大,且隨支鏈增大而增大 。在THFHO 展開溶劑系,Rf 值大小次序苯丙胺酸∼白胺酸∼異白胺酸>纈胺酸 >色胺酸>甲硫胺酸>脯胺酸∼丙胺酸。 ▔ ▔ ▔
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