本實驗目的為了解Xanthomonas campesris 的胞外β─澱粉的生物及生化性質。 X.campesris培養於XOL-Poptone (0.125%)+Yeast Extract (0.1 25%)+Stanh (1%)29℃28小時,離心後取上清液。反應混合液的組成為 :5ml澱粉(1%)+1.0ml磷酸緩衝溶液(0.0275M,pH7.45 )+適當的酵素,使總體積為2ml,於35℃反應10分鐘,反應組成份於反應前 先35℃預熱5分鐘。反應結束後利用Someghi 的方法測還原醣的量,用此資料以決 定酵素的各種性質。 酵素的純化步驟為:菌液離心後經PM30及PMIO二次的超微孔過濾(Uhiafit- ration)陽離子交機樹酯(DE-52)及膠體過濾(gel filtration:Sephadex G -100),純化後的酵素Polyauylamide gel 電泳分析以觀察此酵素是否為均質。酵素 的分子量則用膠體過濾及Poylauylamide 電泳分析決定。酵素的類別則由濾紙色層分 析及高壓液體色層分析測定。 結果,澱粉的各種最佳的反應條件為:溫度45℃-PH6.8,受質飽和濃度為 1%:Km0.033%。此酵素為可誘導生成的胞外β-澱粉,其分子量約為2 0,000dalton純化倍數約20倍。經acuylamde gel 的分析則知接近均質。
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