一、研究目的: 麵包酵母是一富含各種的廉價來源,因此本論文尋找麵包酵母細胞壁的打破方法及 誘導其內醣含量的最佳條件,利用親和性管柱層析法,再配合傳統管柱層析法來純化 種臨床醫用生化化驗配套常用。 二、研究方法 1.以有機溶劑打破麵包酵母細胞壁,並研究浸育時間、溫度、有機化合物對釋出 量的影響。 2.添加不同量的葡萄糖比率,研究不同誘導時間,何種有利於增加麵包酵母內含 量。 3.製備16種Procion dye sepharose ,將含各種的樣品加入各種dye sepharos e ,篩選五種(HK. G6 PDH. 6GDH. MDH. GR )與dye. sepharose間的關係,以做 為我們純化時,選擇活性染料配位子層析法之依據。 4.尋找製備dye-dextran sepharose 最佳條件,並比較相染料量,dye sepharose 與dyedextran sepharose對五種的結合量關係。 5.製備硫醇-雙硫基互換層析與葡萄糖氨層析管柱,再配合活性染料配位子層析法 及傳統方法純化五種。 三、研究結果 由實驗結果知1.以甲苯於40℃水浴浸育1小時,添加Txixton×100對細胞壁的打 破最理想。2.以2%葡萄糖培養基,誘導2小時,對麵包酵母內醇的含量增加最有 效。3.建立16種dye-sepharose 對五種的接合量資料。4.找出製備dye dext ran sepharose 的最佳條件,但相同染料量時,dye dextran sepharose 對enzyme c apacity 未見比dye sepharose 增加。5.五種已部分純化出來。
|