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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:鄭溪潭
研究生(外文):Zheng, Xi-Tan
論文名稱:酸梭菌核酸內切限制的純化與性質
指導教授:陳慶三陳慶三引用關係
指導教授(外文):Chen, Qing-San
學位類別:碩士
校院名稱:國立海洋大學
系所名稱:水產食品科學研究所
學門:農業科學學門
學類:食品科學類
論文種類:學術論文
畢業學年度:72
語文別:中文
中文關鍵詞:酸梭菌核酸限制純化遺傳工程核酸內切限制水產食品科學營養
外文關鍵詞:FISHESFOOD-SCIENCENUTRITION
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今日遺傳工程技術的突飛猛進,可說完全歸功於核酸內切限制的發現與應用。鑑於
以往所發現的核酸限制大都由好氣性菌而來,厭氧菌鮮有人研究,因此本試驗乃以
厭氧菌酸梭菌為材料,探究其有無限制系統,並據以分離核酸限制及研究其理化
性質,以提供遺傳工程研究上的使用及參考。
本實驗自酸梭菌,以酸纖維素及肝素-洋菜膠親和層析純化出一種核酸內切限制
Cac I。經由洋菜膠電泳分析,比較DNA的限制圖型,證實為核酸限制Sau
96 I的同形異質。其對DNA的鑑識核甘酸序列為5’-G-G-N-C-3’
3’-G-G-N-C-5’ 。對 x174RF DNA有二個切割位置。
經純化至均質的Cac I,其次單元分量為32,500,在溶液中似以四倍體存
在分子量為148,000。Cac I的切割反應於鹼性條件下有相當高的活性,
最適酸鹼度為7.5-9.5。最適溫度於PH7.5的Tris緩衝液中為47℃切割反
應需鎂離子當輔因子,其適的鎂離子濃度為5mM,高濃度的鎂離子反有抑制作用。
反應並不一定需鹽,但適量的鹽可增加其反應速,最適鹽濃度為10-50mM,高
鹽反對其活性有抑制作用。Cac I在鹼性條件下較為安定,於酸性條件下活性幾
乎全喪失。對溫度安定性,於45℃以下的溫度相當安定,但在60℃以上則活性喪
失迨盡。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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