從黃菌中可抽出一種耐熱性水解酵素,能催化水解單股核酸成為寡核酸及5'一單 核酸,為進一步探討此酵的特性並擬利用此酵素水解核酸成5'一單核酸。本論文 道先利用下列步驟純化此酵素(1) 以市售麥麩培養黃菌。(2) 從黃菌培養體抽取 粗酵素(3) 以硫酸銨進行鹽析作用( salting out ) 。(4) 以陰離子交換纖維素柱體 分離。(5) 以75號瓊脂糖膠(sepha-dexG-75) 柱體分離。經過上述純化步驟,可得 到1900倍的純化效果和10﹪的回收率。 經純化的酵素依其對基質的特異性、鋅離子的需求、分子量的測定及optimun pH的表 現。鑑定此酵素即為Nucl-ease-S1。更進一步探討其性質,發現(1) 短時間可催化單 股核酸成為寡核酸及單核酸,而經長時間作用所得到產物幾乎都是單核酸。(2 ) 小量的酵素活性單位僅對單股DNA 有水解作用,但在增加100 倍的酵素活性單位, 則可催化水解雙股DNA。
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