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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:楊慈恩
研究生(外文):YANG, CI-EN
論文名稱:γ-ACETOXY-△αβ-BUTENOLIDE對癌細胞作用之研究
指導教授:許隆隆許隆隆引用關係
指導教授(外文):XU, LONG-LONG
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:生化科學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物科技學類
論文種類:學術論文
畢業學年度:73
語文別:中文
中文關鍵詞:癌細胞白血病群落形成抑制作用化學合成法蛋白質γ-ACETOXY-△αβ-BUTENOLIDE
外文關鍵詞:COLONY-FORMATIONPROTEINHELA
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γ-Acetoxy-△α.β-butenolide 為抗白血病物質Cordacin經化學合成法合成的衍生
物。γ-acetoxy-△α.β-butenolide 對Hela細胞具有細胞毒性。當HeLa懸浮培養細
胞(Suspension culture cells)加入不同濃度的γ-acetoxy-△α.β-butenolide
在培養條件下(37℃,5﹪CO2下,于MEN 培養液中)培養24小時後,其抑制百分之五
十細胞生長所需的濃度(ID50)為1.16μM(0.17μg/ml),在上述條件下連續培養
72小時,濃度須提高至3.4μM(0.5μg/ml)才足以抑制HeLa細胞的生長。若把藥品
直接加在培養中的HeLa單層細胞(monolayer cells),其ID50 的濃度為2.25μM(
0.33μg/ml) 。在同樣條件下連續培養72小時,γ-acetoxy-△α.β-butenolide
的濃度也要提高至5.44μM(0.8μg/ml) 才有抑制殘存細胞生長的作用。以群落形
成(colony formation)的方法測定γ-acetoxy-△α.β-butenolide 的細胞毒性時
發現抑制百分之五十的群落形成所需濃度為1.56μM(0.23μg/ml)。在各種實驗條
件下,MEM 培養液中所含10﹪胎牛血清不會明顯地影響γ-acetoxy-△α.β-butenol
ide 對HeLa細胞的細胞毒性。
γ-Acetoxy-△α.β-butenolide 對HeLa細胞合成DNA ,RNA 及蛋白質具抑制作用,
尤以對DNA 及蛋白質的合成所受抑制作用最為明顯。進一步探討發現HeLa細胞攝取(
uptake)14C-thymidine 及14C-uridine 也受到抑制作用,而且細胞攝取14C-thymid
ine 所受的抑制作用比14C-uridine 大。此種細胞攝取nucleotide的抑制件用被認為
該藥物抑制DNA,RNA合成的因素之一。這種結果提示HeLa細胞膜的完整性受到藥物的
影響。γ-acetoxy-△α.β-butenolide 對細胞利用nucleotide pool 亦也些抑制作
用。γ-Acetoxy-△α.β-butenolide 細胞對HeLa細胞的有絲分裂指數(Mitotic in
dex) 並沒有很大的影響,HeLa細胞在培養條件下以1μg/ml γ-Acetoxy-△α.β-
butenolide 處理12小時,只能使MI 值上升至17.6﹪。
利用雙重胸腺核阻滯法(double thymidine block)將細胞同時化(synchronizat
ion) 使細胞滯留在S 相後,根據已知HeLa細胞的細胞週期的運行間,在不同相中以
0.6μg/ml的γ-acetoxy-△α.β-butenolide 在培養條件下處理時發現,在G2相時
對蛋白質合成的抑制作用最(46﹪被抑制),其次是G1相(40﹪被抑制),而對S 及
M 相的蛋白質合成抑制性較小。利用群落生成(colony formation)來觀察γ-aceto
xy-△α.β-butenolide 對HeLa細胞的細胞毒性時,發現G2及G1相的細胞對孳物最為
敏感,亦即這兩相的細胞經γ-acetoxy-△α.β-butenolide 處理後,細胞存活率最
低。
將sarcoma 180 細胞經4μg/ml及6μg/ml的γ-acetoxy-△α.β-butenolide 37℃
,PBS 中處理1 小時後,接種在ICR 小白鼠背部皮下(2.5×105cells/mics) ,經
60天的觀察發現其抑制腫瘤發生率分別為50﹪,100﹪。另以細胞分化不完全的HL-60
細胞試驗γ-acetoxy-△α.β-butenolide 並不能促進HL-60細胞繼續分化。

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