本篇探討一些影響放線菌轉形效率的因素,包括再生培素基的乾燥程度、以澱粉代替 葡萄糖為碳 、覆抗生素的條件、抗生素用量、細胞壁再生培養溫度。結果發現以乾 燥到原重之75%較佳,抗生素thiostrepton用量可降低至5μg /ml,菌體塗抹後 ,加覆抗生素時間18-24hr。為佳,細胞壁再生培養溫度為28℃。並利用上述 條件,以質體pil702由Streptomyces lividans TK-24自我選殖出amylase 基因 ,此段基因位於一段9.7kb DNA之片段上,該雜交質體乃命名為pjC-511;經約 略定出其併圖後,再以核酸鑑識 Kpn I進行次選殖(subvioning),發現該基因位 一段4.7kb之DNA片段上而嵌入之外 來DNA僅剩約3.0kb,攜帶此段DNA之新質體乃命名為pJC -612。本研究亦利用 上述轉形方法,將Streptomyces hygroscopicus ATCC21722之msltogenic enz- yme基因選殖出來,該段DNA的大小、圖譜及酵素活性,仍待進一步探討。
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