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研究生:莊瑞源
研究生(外文):Zhuang, Rui-Yuan
論文名稱:好鹼性Bacillussp.Ya-B之鹼性彈性蛋白酉每基因選殖
論文名稱(外文):Gene cloning of alkaline elastase of alkalophilic Bacillus sp. Ya-B
指導教授:蔡英傑蔡英傑引用關係
指導教授(外文):Cai, Ying-Jie
學位類別:碩士
校院名稱:國立陽明大學
系所名稱:生物化學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物化學學類
論文種類:學術論文
畢業學年度:74
語文別:中文
論文頁數:61
中文關鍵詞:好鹹性彈性蛋白酉每基因酵素生物化學生物學科學
外文關鍵詞:ALKALINE-ELASTASEBACILLUS-SP-YA-BBIOCHEMISTRYBIOLOGYSCIENCE
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好鹼性彈性蛋白酉每(alkaline elastase )是由嗜鹼性Bacillus sp.Ya-B所分泌的酵
素,此酵素分子量為25,000dalton,最適反應pH值為11.75 ,對彈性蛋白(elaastin
)有極高的分解能力。由目前已經定出的部分胺基酸,發現與subtilisin BPN' 及Ca
rlsberg 間具約50%之相似性,為了選殖這酵素的基因,我們參照已定出的彈性蛋白
酉每胺基酸序列,利用phosptotriester 化學合成法,合成一組含96種,長為17個核
酸的探針。並於C1逆性管柱進行純化。同時,利用Hind Ⅲ 限制酉每將Ya-DBNA行完
全切割,以洋菜膠電泳分離不同大小的DNA 片斷,經Southern氏轉印後,知於約2kb
位置之DNA 可和寡核酉每酸控針有明顯的互交反應,將約2kb 的DNA 片斷純化,並銜接
到載體pUC12 ,再轉型到JM83寄主。將選殖到明顯互交的轉型菌,抽取重組質體,發
現插入的DNA 片段約2.3kb ,命名為pBE2,經限制酉每圖譜分析及Southhern 氏轉互交
反應,證實pBE2e可與探針互交在Hind Ⅲ/Pst Ⅰ 切割之0.2kb DNA 片斷。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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