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研究生:陳玉麗
研究生(外文):CHEN, YU-LI
論文名稱:利用線狀噬菌體Cf之複製形DNA的轉染建立柑橘潰瘍病菌的轉形系統
論文名稱(外文):Utilization of transfection of replicative form DNA from filamentous phage Cf to establish transformation system in xanthomonas campestris PV. citri
指導教授:郭宗德郭宗德引用關係楊美桂楊美桂引用關係
指導教授(外文):GUO, ZONG-DEYANG, MEI-GUI
學位類別:碩士
校院名稱:輔仁大學
系所名稱:生物學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1987
畢業學年度:75
語文別:中文
中文關鍵詞:病菌轉染
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本研究的目的為發展及建立柑橘潰瘍病菌的轉染與轉轉形系統。參考數種細菌的轉形
方法並加以改進,最後找出適用於柑橘潰瘍病菌轉形的條件,以冰冷的TEHN緩衝液清
洗並懸浮A660約0.5 的細菌細胞,再懸浮浸漬於冰冷的TMS 緩衝液中2 小時,然後加
入適量之DNA ,充分混勻,置冰中30分鐘,再加入等體積之50%PEG 6000,充分混勻
置室溫20分鐘以下,離心,去PEG ,細菌細胞加入100 ul液體培養基,充分混勻,置
室溫20分鐘以上(視需要而定)。然後用噬菌斑鑑定法鑑定傳染的結果或殖株篩選法
鑑定轉形,所得結果分述如下:⑴傳染效率約2×105 pfu/ug Cf RF DNA.轉形效率為
2×103轉形株/ug質粒DNA (大小約26 pfu/ug Cf RF DNA.轉形效率為2×103轉形株
/ug質粒DNA (大小約26Kb)。⑵在中對數期,即A660約為0.5 之細菌的輚染,轉形
效率最好。⑶雙股環狀DNA 比單股環狀DNA 的轉染效率高。⑷經比較轉形數種革蘭氏
陰性的細菌,此法目前為止只適於柑橘潰瘍病菌。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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