臺灣博碩士論文加值系統

為探討蛇血清中DNA polymerase之存否，將１０３條眼鏡蛇和７７條臭青公蛇血清，
經高速離心（２２K ，２４hr‧tpye ２５ rotor，Beckman ultracentrifuge）後，
用α32ＰｄＣＴＰ標幟DNA ，以洋菜凝膠電泳（agarose gel electrophoresis ）檢
查其DNA pattern和size，結果發現眼鏡蛇４條（３‧８％）和臭青公蛇１條（１‧
３％），與修補過HBV DNA 很類似，其中編號C2最為顯著。進一步再抽取DNA polyme
rase陽性蛇肝DNA ，利用各種不同限制（restriction enzyme）來消化DNA ，HBV
DNA 當探針，藉著南方吸漬雜交法（Southern blot hpbridization ），發現C2肝DN
A 中，有extrachromosomal form的三條雜交帶（１９‧９９Kb，７‧４７Kb和６‧
２７Kb）經過各種限制消化後，得到下列各種大小的雜交帶：
EcoRⅠ—３‧３６Kb
HindⅢ—６‧２４Kb，１０‧３８Kb
Sal Ⅰ—６‧４１Kb，１１‧２２Kb
Pst Ⅰ—６‧２４Kb，８‧９９Kb
Bam HI—１‧２２Kb，３‧６６Kb，４‧８２Kb
蛇肝中能與HBV DNA 雜交的DNA ，其分子生物學上的性質，有待進一步去探討。
以含有IUdR（６０ρg／ml ）之RPMI １６４０ 培養基，在３７℃培養４天之NPC—
２０４細胞（a lymphoblastoid cell line derived from a Taiwan NPC patient）
，經反覆凍結，融化，得含有EB病毒DNA polymerase活性之粗抽取液。
酵素活性０‧８─‘‘１‧０ nits／１０ρ１分別與２００個健康人和２０７個治
療前之鼻咽癌病人血清檢體作酵素活性中和試驗，即測抗DNA polymerase活性之中和
抗體（anti—DNAP），結果發現健康人組之平均中和力價為６７±７３ units／ml s
erun，鼻咽癌病人組的為５８０±２３５ units╱ml serum。
若以健康人組之“平均值＋２標準誤差（mean＋２SD）”值為cut point ，則此酵素
活性中和力價超過２００ units／ml serum認為陽性反應，健康人組之陽性率為６‧
５％，而鼻咽癌病人組高達９１‧３％，這兩組陽性率之差異統計學上具有意義（P
＜０‧０００１）。
Anti—DNAP陽性率與抗EBV DNase 抗體陽性率作一比較，兩者一致性為７７‧３％，
用統計linear trend in proportions 來分析，發現anti—DNAP陽性率隨著病人臨床
病期加重而上升（P ＝０‧０３５７），與anti—VCA IgA 力價也有類似之關連（P
＝０‧００１４），但是anti—VCA IgA 陰性反應時，也能測得到anti—DNAP之陽性
反應。
病人經過治療後，其anti—DNAP中和力價，隨著治療其間而下降，意味著可作為追蹤
治療成效及預後之參考指標。
由以上結果看來，anti—DNase，anti—VCA IgA和anti—DNAP三種檢驗同時作檢查時
，則可以提高其陽性率，以達到早期發NPC 病人，以提高治療之成效。