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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:王健行
研究生(外文):WANG, JIAN-XING
論文名稱:微生物菌體高價值利用-細胞色素C純化分離
論文名稱(外文):High value utilization of microorganism:cytochrome C isolation and purification from yeast cells
指導教授:陳漢恆陳漢恆引用關係潘子明潘子明引用關係
指導教授(外文):CHEN, HAN-HENGPAN, ZI-MING
學位類別:碩士
校院名稱:中國文化大學
系所名稱:應用化學研究所
學門:自然科學學門
學類:化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1987
畢業學年度:75
語文別:中文
中文關鍵詞:微生物菌體純化分離細胞色素-C酵母菌乙酸乙酯自分解
外文關鍵詞:DYNO-MILLBALL-MILL
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本研究乃利用三種不同菌屬及乾燥加工法之乾酵母粉為材料,而以Dyno Mill 、Ball
Mill 及乙酸乙酯自分解等方法破碎細胞壁,並探討其最佳破碎率對萃取時間及萃取
量之影響。同時亦檢討以不同方法及萃取液,萃取細胞色素-C時,對細胞色素-C之純
化分離有何種程度之影響。另外並檢討相同菌屬間,乾燥加工及貯存時間長短,在純
化分離細胞色素-C時會造成何種影響。最後紫外光吸收光譜儀、原子吸光光譜儀、元
素自動分析儀及紅外光光譜儀等分析儀器,檢測以本研究之方法所純化分離之細胞色
素-C之純度。
結果我們認為由酵母菌體中,純化分離細胞色素-C時,在菌體選擇上應選擇新鮮且以
氐溫乾燥之酵母粉為佳。在高效率破碎細胞壁選擇上,應採用Dyno Mill ,並以0.
2∼0.3mm直徑之玻璃珠,在2500rpm 下,以每小時5∼10升流出量為操作
條件為最佳,其細胞壁膜之破碎率可達99.5%以上。在萃取時間縮短及減少變質
機率發生之選擇上,亦以採Dyno Mill 為佳,因為以Dyon Mill 破碎之酵母菌,在萃
取時間花費上只有以乙酸乙酯自分解法的1/8時間同時也較Ball Mill 破碎法結省
2/3時間。在離子交換樹脂吸附及溶離條件之選擇上,則以Amberilite CG-50弱
酸性陽離子交換樹脂(weak carboxylic acidion-exchanger )配合以20%,pH8
.0之飽和硫酸銨溶液溶離吸附於6×4之管柱上之細胞色素-C.然後以90%飽和
度之硫酸銨溶液,飽和沈澱雜質,經透析後通入2×10管柱中,以同樣過程溶離細
胞色素-C及沈澱雜質。最後經1×20管柱吸附後,以1N ,pH8.0之磷酸緩衝溶
液溶離效果最好。在結晶過程中,則以95%硫酸銨飽和度溶液在pH=9.0及少量
維他命C (Ascorbic acid )添加下,結晶還原態細胞色素 產量最好。
以本研究之條件純化分離(purificatiaon and separation)細胞色素-C,除了可以
獲得高產率210mg/kg外,更可以獲得以紫外光譜儀(U .V .)、元素分析儀(
Element alanalyzer),原子吸光光譜儀(A .A .),及紅外光譜儀(I .R .)
等方法證實高純度之細胞色素 。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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