臺灣博碩士論文加值系統

環狀糊精葡萄糖基轉移（ＣＧＴ）可催化基質之環化，偶合及分配反應，環化反
應可將澱粉轉變為環狀糊精（ＣＤ），主要的有α－ＣＤ，β－ＣＤ及γ－ＣＤ，分
別是６，７及８個葡萄糖所組成之環狀寡糖，本研究的內容為純化不同來源的ＣＧＴ
，並探討其免疫性質之異同。
酵素的純化方面，Bacillus macerans 培養液，經硫酸銨劃分沈澱，Sepharose CL-6
B 膠體過濾層析，DEAE-Sepharose CL-6B離子交換層析，Sephacryl-200 膠體過濾層
析，得到的ＣＧＴ為ＣＧＴＡ。而由Bacillus sp 之粗酵素粉末，經過抽取，硫酸銨
劃分沈澱，Sepharose CL-6B 膠體過濾層析，DEAE Sepharose CL-6B離子交換層析，
分離得到三個具有不同電泳移動距離的活性部分，依照由離子交換層析管柱被沖離的
先後，定為ＣＧＴＢ，ＣＧＴＢ及ＣＧＴＢ。
以ＣＧＴＡ免疫大白兔，所得抗血清，對ＣＧＴＡ，ＣＧＴＢ，ＣＧＴＢ，ＣＧ
ＴＢ進行免疫雙向擴散，ＣＧＴＡ可與抗血清產生沈澱線，而ＣＧＴＢ，ＣＧＴ
Ｂ及ＣＧＴＢ則無沈澱線產生。抗血清經純化可得到免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ），
以間接型ＥＬＩＳＡ測定ＩｇＧ對ＣＧＴＡ及ＣＧＴＢ之結合能力，發現ＩｇＧ對
ＣＧＴＢ亦有相當的結合能力。故推測二者有若干相同之抗原決定部位，將ＩｇＧ
經由ＣＧＴＡ及ＣＧＴＢ親和型層析，我門可以得到數種特殊的ＩｇＧ區分，分別
為nonantiAIgG, antiA antiBIgG, antiA non antiBIgG 。由這些特殊的免疫球
蛋所對四種ＣＧＴ的活性的影響中，推測antiA antiBIgG，其種類可能極少，故對
四種ＣＧＴ的活性沒有產生抑制作用。
以胰凝乳蛋白及木瓜作用於ＣＧＴＡ及ＣＧＴＢ所得之胜圖譜，二者皆不相
同，而以antiA antiBIgG, antiA non antiBIgG對轉印後之胜圖譜作免疫染色
，antiA antiBIgG對某些ＣＧＴＢ的胜片段有親和性，這些片段對酵素的活性
可能有相當的重要性，值得進一步探討。