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研究生:夏懷安
研究生(外文):XIA, HUAI-AN
論文名稱:傳染性華氏襄炎單源抗體之研製
指導教授:謝快樂謝快樂引用關係
指導教授(外文):XIE, KUAI-LE
學位類別:碩士
校院名稱:國立中興大學
系所名稱:獸醫研究所
學門:獸醫學門
學類:獸醫學類
論文種類:學術論文
畢業學年度:76
語文別:中文
中文關鍵詞:華氏襄炎病毒抗體單源抗體雞胚胎組織培養法瓊脂免疫擴散沈澱酵素結合免疫吸附
外文關鍵詞:AGPELISA
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傳染性華氏囊炎病毒D -78株,分別以雞胚胎和組織培養法增殖,再經10%PEG
6000和20∼50%連續蔗糖梯度純化,在35%處有病毒層,用陰染法在電子
顯微鏡下觀察,病毒大小約50∼60um,六角形。
以純化病毒,君上佐劑,免疫BALB/C 鼷鼠腹腔和皮下補強兩次,由眼窩或尾靜脈採
血,作瓊脂免疫擴散沈澱法(AGP )測定抗體力價,若有正反應,則靜脈補強抗原0
.1ml,3∼4天後製備融合瘤。
融合時,用SP-2和老鼠脾臟細胞,在40%PEG 1000的輔助下融合,以HAT 培
養基篩選有脾臟細胞和SP-2細胞雙重特性的融合瘤,10∼14天後,以酵素結合
免疫吸附法(ELISA )篩選有抗體分泌能力的融合瘤,再經極限稀釋法(limiting d
-ilution)單株化,一共得到11株分泌單源抗體的融合瘤。
取其中三株生長快速和穩定的融合瘤,分別命名A -1、A -2、A -3大量增殖,
且以腹水法取得大量單源抗體,以供定性。
以間接螢光染色法(IFA )測定,均與D -78株,有特異性反應,而中和試驗,均
呈陰性反應,顯示此三株抗體均無中和能力。

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