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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:蕭禎慧
研究生(外文):XIAO, ZHEN-HUI
論文名稱:BACILLUSCIRCULANSβ-澱粉水解酵素基因在大腸桿菌的選殖
論文名稱(外文):BACILLUS CIRCULANS β-澱粉水解酵素基因在大腸桿菌的選殖
指導教授:周德源
指導教授(外文):ZHOU, DE-YUAN
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣師範大學
系所名稱:生物學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1988
畢業學年度:76
語文別:中文
中文關鍵詞:澱粉基因大腸桿菌
外文關鍵詞:BACILLUS-CIRCULANS-BSDS-POLYACRYLAMIDE
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以pBR322當載體,利用Escherichia coli選殖B. circulans β -澱粉基因,用以
研究細菌β -澱粉基因的構造、表現和分泌機制。先將B. circulans 染色體DNA
用Sau 3A 部分切割後,所以得5Kb 左右的DNA 片段,與經BamHI 切割的pBR322連接,
轉形到E. coli BNN45,構築完成B. circulans 基因庫。再利用碘液染色法於基因庫
中進行篩選,亦即在含有澱粉的LS平板染色,挑選有粉紅色環的菌株,該菌株經多次
轉移,仍然可以在含AP的LS平板穩定地分泌β-澱粉 。
經DNA-DNA 雜配證明其上4.95Kb的嵌入基因確實來自B. circulans,進一步做基因切
除拼圖,可以將嵌入基因縮小到2.25Kb的EcoRI-PstI片段,仍保有分泌β-澱粉的
生活。將E. coli 轉形株產生的澱粉與由B. circulans抽取的酵素做一比較,二者
均會水解澱粉,得到的小分子產物只有麥芽糖,而無葡萄糖。進一步在SDS-polyacry
lamide膠體電泳分離蛋白質後,經活性染色,發現澱粉分子量主要在62000Dalton
左右。為了深入了解β-澱粉基因素現和分泌的調節機制,有待分析其核序列,
這一部份工作正在進行中。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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