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研究生:邱乾順
研究生(外文):GIU, GAN-SHUN
論文名稱:豬生長激素化學修飾之研究
論文名稱(外文):The study of chemical modification of recombinant porcine growth hormone
指導教授:張文章
指導教授(外文):ZHANG, WEN-ZHANG
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:生化科學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物科技學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1988
畢業學年度:76
語文別:中文
論文頁數:40
中文關鍵詞:生長激素激素豬生長激素化學修飾放射免疫測定法鴨生長激素
外文關鍵詞:GROWTH-HORMONEHORMSNERECOMBINANT-2-NITROPHENYL-SULFENYL-CHLORIDGLUTARALDEHYDE-GARADIOIMMUNO-ASSAY-PORCINE-GROWDUCK-GROWTH-HORMONE
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遺傳工程生產之豬生長激素(Recombinant Porcine Growth Hormone,rPGH),使用
2-Nitrophenyl-sulfenyl chloride(NPS-Cl) 與Glutaraldehyde(GA)做化學修
飾。由Methanesulfonic acid水解分析與spectrophotometry 法,證明NPS-Cl作用在
rPGH之Tryptophan上,且其反應程度接近完全。以放射免疫測定法(Radioimmunoass
-ay) 測定,其結合能力降至未經修飾的rPGH之1/10。以腦下腺切除之Long Eva
-ns 雌鼠做生物檢定(Biological activity)。
Glutaraldehyde可使豬生長激素產生分子間和分子內之架橋反應(Cross-linking)
。在大於0.1%的Glutaraldehyde作用下,其產生之單元體(Monomer) 與雙元體
(Dimer)在SDS-PAGE 上之移動速率較未反應者快。在0.5%Glutaraldehyde溶液
中反應後之GA-rPGH 以HPLC之Gelfiltration column(Waters Protein PAK 300
sw)分離得到其單元體(M-GA-rPGH) 與雙元體(D-GA-rPGH)。以放射免疫測定法
比較M-GA-rPGH、D-GA-rPGH、rPGH和抗體結合之競爭能力,結果經修飾過之rPGH,其
競爭能力降低至1/3-1/5。Glutaraldehyde濃度對反應程度影響極大。
將鴨生長激素(duck Growth Hormone,dGH)之互補基因(cDNA)構建於pSV-neo 之
SV40 promoter 後面,感染(Transfect) 到Cos-I 細胞後,其培養基液經放射免
疫測定,初步證實具瞬間表現(Transient expression)之現象。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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