由於目前尚無良好研究肝細胞分化的系統,因此,我們採用體外培養系統作為研究肝 細胞分化的模式。首先使用Ad5-SV40融合病毒將Balb/c 成年小鼠的初代肝細胞 培養轉型成功而建立AMH 5(Adult Mouse Hepatocyte5)之肝細胞株。再利用分株 法(cloning )將細胞依形態不同分成三類(纖維母細胞型、肝細胞型、中間型), 九純株以作各種研究。使用北方氏轉印雜交法證實有SV40病毒RNA 的表現。這些細 胞株複製時間為21.6至36小時,其細胞飽和密度則為2.94×106 至6. 3×106 Cells /0.03c㎡ 。將107 細胞注入裸鼠皮下均能產生腫瘤;而在 甲基纖維素培養基生長有0.4%至14.7%的細胞群形成率。使用螢光抗體實驗 和過氧化 染色法證實此株細胞有class I 組織移植抗原的表現。使用雙向免疫擴散 法,補體結合法和北方氏轉印雜交法測定轉運鐵和白蛋白基因之表現,發現這些細胞 株對這兩種基因有不同程度之表現,但均會分泌轉運鐵,因此證明這些不同形狀之細 胞株皆為肝細胞。
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