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豬水泡病毒單源抗體的研製係以四週齡BALB/C小鼠經純化豬水泡病毒4次免疫 後,取其細胞與NS-1骨髓瘤細胞以50%PEG 1500(Polyethylen gly- col )進行融合反應,並以HAT(Hypoxanthine ,Aminopterin ,Thymidine)培養 基及ELISA法(Enzyme linked immunosorbent assay )進行篩選,融合成功且 具分泌抗體能力之融合瘤細胞再經極限數稀釋培養(Limiting dilution )、胜鈦免 疫轉印法(Immunoblot)及定性檢定(Isotyping )以檢出分泌單源抗體之融合瘤細 胞。 病毒蛋白的分析分別應用12.5%的不連續性SDS-PAGE(Sodium dodecy- lhydrogen sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)、胜鈦免疫轉印法及放 射能自動照相術(Autoradiography ; Fluorography)分析之。 本研究之結果共獲得7株分泌單源抗體之融合瘤細胞,其所分泌之單源抗體均為Ig Gl(重鏈為rl,輕鏈K),均作用於病毒蛋白VP1,且皆無中和能力,以小白 鼠生產之腹水抗體經ELISA判定力價均達6萬倍以上;病毒蛋白的分析以SDS -PAGE及Immunoblot可檢出VP1、VP2及VP3,而以Fluorography則可檢 出VP0、VP1、VP2、VP3及VP4,各病毒結構蛋白之分子量分別為VP 0-37Kd(Kilodalton)、VP1-32Kd、VP2-28Kd、VP3-3 1Kd、VP4-14.4Kd。
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