檸檬酸係屬微生物代謝路徑上所產生之有機酸，可做為食品工業上之酸化劑，化學工
業之防銹劑及清潔劑之顆粒成型劑。本研究從自然界中採集三十二個土壤樣品，總共
分離出 953 株能利用液態石臘做碳源之菌株，其中三株具有可生成檸檬酸之能力者
。將此三株菌改用正十二烷為碳源觀察其生產檸檬酸之穩定性，結果發現於繼代培養
中其產量均極穩定，其中以編號為CCU-C-87 菌株的產量為最高。
以振盪培養法探討檸檬酸生成之最適培養條件及培養基組成份，結果為每升培養基含
4%n-do-decane ，0.4 ％KHPO，0.3％CHCOONH，0.4 g／L yeast extract，
50 ppm Mg，2 ppm 的Mn及Cu 等。將培養液pH值調到 6.5，並裝120 mL
培養液於500 mL Hinton 氐培養瓶中，在２８℃下振盪培養6 小時後加入0.8％ 的碳
酸鈣，繼續培養90小時後能獲得11.94 g／ L之檸檬酸。 鎂（Ⅱ）離子可做為菌體生
長的促進劑，少量的銅（Ⅱ）錳（Ⅱ）離子對CCU-C-87菌株的生長及代謝生酸皆有促
進作用，而Fe，Zn，Co，Mo，及Pb卻有抑制生長及代謝的作用。低
級醇並不能增加菌株對鋅（Ⅱ）離子的忍受力。經由紅外線光譜儀，核磁共振光譜儀
及質譜儀鑑定CCU-C-87所生產的檸檬酸化學結構與標準的檸檬酸相同。