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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:潘台龍
研究生(外文):PAN, TAI-LONG
論文名稱:類胸腺素(PARATHYMOSIN)構造及功能之研究
指導教授:高玲君高玲君引用關係
指導教授(外文):GAO, LING-JUN
學位類別:碩士
校院名稱:國立成功大學
系所名稱:生物化學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物化學學類
論文種類:學術論文
畢業學年度:77
語文別:中文
中文關鍵詞:類胸腺素胸腺
外文關鍵詞:PARATHYMOSINLIVER
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由胸腺萃取液分離出來的胜在維持免疫反應之後展及平衡上佔有極重要的地位。目
前已有多種胸腺因子純離並鑑定成功,包括Thymosin α1 ,thymosin β4 ,thym
opoietin及thymulin,這些因子均具有免疫調節的功能。最近並有thmosin α1之前
軀物prothymosin α及類似物parathymosin之報導。由組織分佈研究,顯示prothymo
sin α主要存於胸腺中,而parathymosin則在肝臟中含量較高,這兩種胜之生理功
能目前尚不清楚。
本論文由豬、小白鼠及大白鼠肝臟中純離parathymosin並研究其化學構造及生物性質

新鮮肝臟切碎後,先用沸水處理,繼以均質、離心、過濾等步驟得一精萃取液。此萃
取液經過膠質層析過濾(Sephadex G-100)及逆相高效能液態層析法(RP-HPLC
)以μBondapak C18 層柱分離。純化得到的胜以胺基酸分析儀分析其組成及定量
。為鑑定純化胜之化學結構,乃利用不同之蛋白水解(trypsin 及thermolysin
)將胜切成片斷,再以RP-HPLC分離生成比多鏈之類圖譜(peptide map ,各
片斷經收集後以胺基酸分析儀定量並定其組成,再以蛋白質∕胜定序儀(ABI 47
7A/120A)定序。此定序儀以Edman degradation 法順序切斷胜腱並以連線
之PTH analyzer鑑定序列。除此之外,又利用高壓電詠法(High voltage paper ele
ctrophoresis)分離一些在HPLC無法分離之片斷,分析其組成及次序,然後結合這些
片斷之重疊處,而完成多鏈的胺基酸次序。純化胜之生物性質以γ-interferon
,tumor necrotic factor ,interleukin-2 receptor等方法方析(此部份係與台
北榮民總醫院合作完成)。
由不同動物肝臟分離純化的parathymosin其含量以μg∕g tissue 表達如下:小白鼠
(Balb∕c mice):44﹒43;大白鼠(S﹒V﹒rat ):48﹒68;豬:32﹒
56。Parathymosin約含有105個胺基酸,不含有芳香族或含硫胺酸,但含有較多
之酸性胺基酸,如胺酸(Glu ),天門冬胺酸(Asp );其N-terminal 為衍生物阻
擋。中間有一段含有高量之Asp 及Glu ,尚無法完成定序。
實驗資料顯示小白鼠之parathymosin和大白鼠之parathymosin有著99%相源之結構
,而豬之patathymosin則有數個胺基酸變異,其相源性為96%,其結果與鈖子演化
(molecular evolution )之預測相吻合。類胸腺素之生物活性及功能研究,曾利用
數種生物活測定法鑑定之。以人類臍帶血分離出之白血球測試porcine patrthymosin
之生物活性發現該胜具有增強γ-interferon之能力,同時在數種生物活性分析法
均顯示parathymosin及prothymosin α在免疫上具有相互調節及平衡之功能。另外利
用蛋白質序列檢索,發現parathymosin與cytochrome C1reductase有40﹒3%之相
源性,這些資料將有助於探討其生理功能。

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