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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:許壽山
研究生(外文):Xu, Shou-Shan
論文名稱:胸腺激素在白兔組織中構造與分佈之研究
指導教授:高玲君高玲君引用關係
指導教授(外文):Gao, Ling-Jun
學位類別:碩士
校院名稱:國立成功大學
系所名稱:生物化學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1989
畢業學年度:77
語文別:中文
論文頁數:81
中文關鍵詞:胸腺激素胸腺激素白兔生物化學生物學科學
外文關鍵詞:THYMIC-HOUMONESTHYMUSHOUMONESRABBITBIOCHEMISTRYBIOLOGYSCIENCE
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胸腺(thymus)在早期一直被認為是一個退行性的器官,且其生理功能並不清楚。直
到1961年Miller作了新生動物胸腺切除(neonatal thymectomy)的研究後,才
確立它在維持生物體正常發育和免疫平衡上的地位。近年來,學者們由各種動物體的
胸腺中提純胸線激素(thymic hormones),進行有關化學和生物性質方面的研究,
已得到相當的了解。這些實驗更證實了它具有促進生物體內T 淋巴細胞分化及成熟的
功能。
為了進一步探討胸腺激素在不同組織器官中含量的分佈和不同年齡層中的變化,本實
驗即以紐西蘭種白兔的各部位組織作為研究材料,以蛋白質定序法來作各成份的鑑定
及胜一級構造的研究,並與由其他動物所提純的胸腺激素作構造上的比較。
由不同年齡的紐西蘭種白兔中(一個月、三個月、六個月、),取下內臟組織,包括
胸腺(thymus)、脾臟(spleen)、肝臟(liver)、腦(brain)、心臟(heart )
、腎臟(kidney)及肺(lung)等,於4℃下切碎,在沸水中加熱處理5分鐘,迅速
地降低4℃後,以均質機(polytron)來完成均質作用。經過高速離心、過濾、除去
雜質,所得濾液以三氟乙酸(trifluoroacetic acid)滴定至ph3,再經離心過濾和
真空濃縮等步驟,得到粗抽取液(crude extract )。進而利用反相高效能液態層析
法(RP-HPLC,Waters Asso﹒)分離純化,依圖譜分析(Beckman 6300 amino aci
ala
d analyzer)。與文獻的已知結果作比較,得知所純化的胜類似thymosin β4 、
arg ala arg
prothymosin α、thymosin β10和parathymosin。β4 及β10的分子量約5000
,而prothymosin α和patathymosin則約為12000。再以Sephadex G-100 作大
量分離純化的實驗, 由此收集下的胜,進一步利用trypsin 或CNBr來作胜圖譜)
peptide mapping)的研究, 進而利用氯相蛋白質順序儀(ABI 477A∕120A)
探討這些胜的胺基酸排列順序。
各部位組織器官抽取液經 RP-HPLC 分離、水解所得的胺基酸組成分析結果,得知
ala arg
thymosin β4 和 THYMOSIN β10有相近的組成。經CNBr作用後,再做定序研究。
ala arg
thymosinβ4 和thymosin β10在一級構造上有75%的相似性。至於prothymosin
α和parathymosin,由組成分析的結果得知二者皆為富含Glu.和Asp.的酸性胜,但
彼此的差異性較大。
至於不同年齡、組織抽取液在含量的分佈研究上,可發現胸腺是含prothymosin α最
ala arg
多的組織,尤其在一個月大時可高達250μg∕g tissue. 而 β4 及 β10 則
4 10
在所探討的組織中皆有發現, 並以脾臟含量最高 105 μ g/g 160μg/g
關於parathymosin 在一個月大的幼兔中只存於liver 。這些含量分佈會依動物年齡
的增長而有下降的趨勢,特別是在胸腺的變化最為明顯,其它組織則較不顯著。

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