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研究生:王姿文
研究生(外文):WANG,ZI-WEN
論文名稱:十字花科黑腐病乾菌落突變株的互補基因之選殖與核酸定序
論文名稱(外文):Cloning & sequence of a 3.5 kb BamHI fragment that complements the non-mucoid mutant S6 of xanthomonas campestris pv. campestris
指導教授:曾義雄曾義雄引用關係
指導教授(外文):ZENG,YI-XIONG
學位類別:碩士
校院名稱:國立中興大學
系所名稱:植物學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1990
畢業學年度:78
語文別:中文
中文關鍵詞:十字花科黑腐菌乾菌落突變株互補基因選殖核 酸定序重組質體
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pS601B 是一個由Xanthomonas campestris pv.campestris 基因庫中篩選出來的重組
質體, 帶有一3.5 kb之BamHI片段。當初基因庫之構築係以Sau3Al 切割 X.campestri
s 之DNA 后接于一可移動的(mobilizable)泛寄主載體pCP13所完成。將pS601B以接合
作用送入胞外名醣 xanthan polysaccharide (簡稱XPS) 合成缺失株( 亦稱乾菌突變
株) 可以受互補而恢復成野生型可見此段 DNA 帶有部份 XPS 合成基因(XPS) 。本研
究將 S601B片段次選殖于 pBR325 上, 命名為 pBES6, 以各稱鑒識繪切割, 定出鑒識
圖譜。然后, 進行S601B 片段的deletion mapping, 而知其上之基因可能橫跨PstI兩
端。S601B 片段與其他xps 基因的關係位置, 經hybridization , 鑒識圖譜分析與互
補作用的結果, 知其連接了 P2402B 最右端的2 kb Eco RI與P4201B 最左端的14 kb
Ec o RI 片段。以minicell分析, 發現S601B 主導一個約47 kd 的蛋白質。經核 酸
定序分析發現一個open reading frame(稱為 ORF 418)足以主導一個 46,846 dalton
的蛋白質, 由此看來, ORF 418 產物似無經轉譯后加工等過程。ORF 418 上游未見有
典型之啟動子序列, 但有類似于Klebsiella pneumoniae 之RNA 聚合繪Obo 所辨認的
啟動子序列GG--10--GC; 在ORF 418 下游則無典型轉錄終止信號。經以電腦比對, OR
F 418 之核 酸序列與Azotobacter vinelandii的 dihydrolipoyltrans-acetylase
基因有54.8﹪同質性, 但與其胺基酸序列之同質性則甚低(6.5﹪)。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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