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研究生:杜文珍
研究生(外文):DU,WEN-ZHEN
論文名稱:假性狂犬病毒台彎分離株DNA的比較
指導教授:張天傑
指導教授(外文):ZHANG,TIAN-JIE
學位類別:碩士
校院名稱:國立中興大學
系所名稱:獸醫研究所
學門:獸醫學門
學類:獸醫學類
論文種類:學術論文
畢業學年度:78
語文別:中文
論文頁數:81
中文關鍵詞:假性狂犬病毒台彎分離株免疫吸附法聚合 鏈鎖反應
外文關鍵詞:DNA(POLYMERASE CHAIN REACTION
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本試驗採取由台灣不同地區,不同時間分離的假性狂犬病毒分離株:北部(TP 株—
1984; P 株—1986 ), 中部(CS株—1989,NCHUI株—1986, CN株—1985)及南部(
TNL 株—1976, PT株—1989)等共七株病毒進行比較分析。這些病毒株經三次病毒斑
純化後再增殖,由其核蛋白衣中萃取病毒DNA;再與兩株會發表的美國分離假性狂犬病
毒株—UCD 株及Shope 株的DNA 以限制 Kpol, BamHI, pvuⅡ,HindⅢ,Smal及EcoRI
做限制 切割分析, 比較其限制 切割片段的總數,在設定區間內的片段數目及其經
瓊膠電泳分析後,切割片段移走分佈的模式及片段的大小。經由限制 切割分析比較
,發現台灣分離株與美國分離株的片段模式之差異很大,而台灣分離株本身各株之間
亦有不小之差異。
此外本試驗再配合酵素結合免疫吸附法(ELISA )及抗體中和反應, 由各病毒株與單
源抗體0219-1,(二)E7.0826及高免血清作用的情形來做病毒之間之比較。發現由抗
體中和的應,無法做株別間之區別,但由ELISA 則可以予以區別。此外,並發現TNL
株與TP 株較相近, 其次是Shope 及P 株。故可知利用ELISA技術配合單源抗體之使
用, 可做為鑑別病毒株之方法。
而由BamHI 及KpnI的限制 片段模式發現病毒DNA 的U 區(約map 上0.1∼0.3, 0.5
∼0.6 的位置)是較固定, 不易產生改變的區域, 故可利用這基礎作為日後研究以聚
合 鏈鎖反應(polymerase Chain ReaCtion,簡稱PCR )作為敏感而可快速診斷假性
狂犬病毒之用。

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