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研究生:陳啟武
研究生(外文):CHEN,QI-WU
論文名稱:核多角體病毒潛伏感染特異基因與其抗病毒機制的探討
論文名稱(外文):Molecular analysis of baculovirus persisitency-associated gene and its anti-viral activity
指導教授:陳煒富趙裕展
指導教授(外文):CHEN,WEI-FUZHAO,YU-ZHAN
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:獸醫研究所
學門:獸醫學門
學類:獸醫學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1991
畢業學年度:79
語文別:中文
論文頁數:60
中文關鍵詞:核多角体病毒潛伏感染特異基因抗病毒機制質体同源性轉譯層次染色体
外文關鍵詞:(HELIOTHIS ZEA-1 BACULOVIRUS)(HOMOLOGOUS)(TRANSLATIONAL LEVEL)
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將已選殖出的Hz-1核多角體病毒 (Heliothis zes-1 Baculovirus)潛伏感染特異基因
-1 (persistency-associated gene-1,PAG-1)以質體型太送入細胞中做短暫表現(tr-
ansient expression) ,再抽出細胞內全部的RNA 做Northern hybridization,證明
PAG-1 是個immediate-early gene。換言之,只在要此基因單獨進入細胞,不需要病
毒其它基因的幫助,就能轉錄出 RNA。
利用分子生物學的技術,將果蠅的 heat shock promoter及抗 neomycin 的基因和PA
G-1 連接,再以線狀質體的型態插入宿主細 胞的染色體中,經G418初步篩選後共獲
得一百多個具有抗性的細胞族群,再疳其單株體後取出八株transformed cell line-
s ,分別抽取細胞內的染色體和RNA ,以Southern hybridization證明:PAG-1 已成
功的插入每個transformed cell lines中,而且所插入的位置及數目皆不相同。再以
Northern hybridization證明:(1) 插入細胞染色體中的PAG-1 仍具有功用,可以轉
錄出 PAT-1(persistency-associated transcript-1) 。(2) transformed cell li-
ne中 PAT-1的含量和自然情況下的潛伏感染細胞株極為燈似。最後在轉譯層次 (tra-
nslational level) ,以SDS-polyacrylamide gel的蛋白質電泳圖上來分析:trans-
formed cell line並沒有因為比正常的細胞多了 PAG-1,而使所 產生的主要蛋白質
(major protein) 有所增減,由此和PAG-1 序列分析(sequencing)上所得到的資料相
對照,更證明了 PAG-1不會產生蛋白質。於病毒的感受性方面,將Hz-1及AcAK2 ( 另
一種baculovirus)病毒分別感染 transformed cell lines 和正常細胞,發現一旦P-
AG-1插入染色體後,會使得細胞對於同源性(homologous)或是非同源性(heterologo-
us) 的病毒皆具有較正常細胞強10-250倍的抗病毒特性,但就更深一層的轉錄層面來
研究,transformed cell lines中的 PAT-1並不會明顯的阻礙病毒其它基因的轉錄,
所以其抗病毒特性可能並非來自於直接影響病毒基因轉錄。

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