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研究生:賴超坤
研究生(外文):LAI,CHAO-KUN
論文名稱:新城雞瘟病毒F/HN基因片段之選殖
論文名稱(外文):Molecular cloning of the F/HN gene fragment of Newcastle disease virus genome
指導教授:陳煒富
指導教授(外文):CHEN,WEI-FU
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:獸醫研究所
學門:獸醫學門
學類:獸醫學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1991
畢業學年度:79
語文別:中文
論文頁數:103
中文關鍵詞:新城雞瘟病毒病毒特異性引子聚合 連鎖反應模板核 酸限制
外文關鍵詞:F/HN基因片段(NEWCASTEL DISEASE VIRUS)(SPECIFIC PRIMER)(POLYMERASE CHAIN REACTIONPC)(TEMPLATE)
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為膫解新城憐瘟病毒(Newcastle disease virus) 強毒株 691036的 F/HN 基因邊界
(gene boundary) 之結構。應用純化病毒RNA 及人工合成之病毒特異性引子(comple-
mentary DNA ;cDNA),結果得到 500bp至 9kb不等的 cDNA 片段,將其作為進行聚合
連鎖反應(Polymerase Chain Reaction,PCR) 之模板(template)。接著再以 F/ HN
基因邊界兩端核 酸序列,作為進行 PCR增幅 (amplification)該片段之引子,合成
出 F/HN 基因邊界。再選其中間二十個核 酸序列,作為探針,經Southern blot h-
ybridization證實該PCR 增幅產物為F/HN基因之片段。
F/HN基因之片段經 PCR大量增幅後,使用Qiagen-column 純化該片段,選殖入pBlue-
scriptⅡ KS 載體,以限制 切割篩選白色 菌落,只得一株陽性菌落,將其大量培
養後,萃取其質體DNA ,再以CsCl-EtBr 梯度高速遠心純化質體DNA ,取134ng pla-
smid DNA經 Apa I限制 切割和未切割,分別進行 0、10、15、20、25、30、35個P-
CR循環反應,結果顯示各於10個及15個循環之PCR 反就見其增幅產物。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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