利用純化新城雞瘟病毒HN醣蛋白(Hemagglutinin-neuraminidase) 、F 醣蛋白(Fusi- on glycoprotein)及 M蛋白 (Matrix or membrane protein) 免疫原以製備 單源抗 體,並篩選具有中和與保護作用之單源抗體,可應用於病毒抗原分析及抗特異型抗體 疫苗(Anti-idiotypic antibodies vaccine) 之研究,為本論文研究之目的。 純化之新城雞瘟病毒顆粒,經Tritton X-100 處理去除NP核鞘蛋白及以非還原態 3mm 厚 Sodium Dodecy1 Sulfate Polyacrylamide Gel electrophoresis(SDS-PAGE),再 經4M的醋酸納沉澱法處理後下 F醣蛋白帶,並與 NDV HN、F、M 及病毒蛋白分別免疫 BALB/c鼷鼠,以一次脾臟內接種及一次尾靜脈注射,並利用融合瘤技術製備抗新城憐 瘟病毒特異性單源抗體,而以酵素連結免疫吸附法、間接螢光抗體法篩選分泌抗新城 雞瘟病毒特異性單源抗體之融合瘤細胞,再以放射線免疫沉澱法測定新城雞瘟病毒之 特異性單源抗體。 本實驗共得六株抗新城雞瘟病毒特異性單源搞體,並將此六株單源抗體進行血球凝集 抑制試驗,其中二株抗HN單源抗體具有血球凝集抑制功能,而二株 F單源抗體與 M單 源抗體則無血球親自集抑制功能。
|