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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:吳定峰
研究生(外文):Wu, Ding-Feng
論文名稱:利用植物固醇為原料,以微生物轉換法生產男性荷爾蒙睪固酮之研究
論文名稱(外文):Microbial transformation of testostrone from phytosterol
指導教授:劉文雄劉文雄引用關係
指導教授(外文):Liu, Wen-Xiong
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:農業化學研究所
學門:農業科學學門
學類:農業化學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1991
畢業學年度:79
語文別:中文
論文頁數:82
中文關鍵詞:植物固醇微生物轉換法男性荷爾蒙睪固酮β-羥基類固醇去睪固酮農業化學β-羥基類固醇去β-羥基類固醇去β-羥基類固醇去
外文關鍵詞:AGRICULTURECHEMISTRY
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一、研究目的:探討Mycobacterium sp. MRRL 3805 對植物固醇進行 酵,直接生產
睾固酮之可行性,以期能利用國內大量的的植物固醇生產高睾固酮, 另外亦對Mycoba
-cterium sp.NRRl 3805 之β-羥基類固醇去氫繪之存在與性質加以探討。
二、文獻
1.W.H.Liu,Microbial transformation of testosterone from cholesterol.Procee
dings of Interational Biotechnology Conference held at Nassey University,N
ew Zealand(1990).
2.W.H.Liu,Fermentation process of c-17 keto-steroids,Report of Natl.Sci.Co
unc.of Taiwan(1987).
三、研究方法:
1.菌種:本研究采用17- 酮基類固醇化合物中間體雄烯二酮生產菌mycobacterium sp
.Nrrl 3805。
2.培養基(NH ) CH COO,1.5g/L;KH PO ,0.8g/L;K HPO ,0.4g/L;MgSO ‧7H O,2g/L;F
eSO ‧7H O,5mg/L;ZnSO ‧7H O,2mg/L;Mncl ‧4H O,0.5mg/L;petone,10g/L。
3.培養基之探討:殺菌後,於30℃下,振盪培養五天。
4.小型 酵槽生產條件之探討:於 酵槽中,采用表面通氣方式,培養六天。
5.β-羥基類固醇去氫繪活性的測定:先將以下四物質加入測光槽中0.1M phosp-hat
e buffer(ph6.0),0.6ml;deionized water,2.0ml;6mM江β-NADH,0.2ml;Enzyme in 0
.1Mphosphat buffer(pH7.2),0.1ml 然後將0.1ml 0.015% ADin Ch OH 加入測光槽中
成3 毫升,在25℃下,開始進行酵素反應,每隔1 分鐘記錄一次0.D.值。
四、研究內容:培養基及 酵槽生產條件探討;β-羥基類固醇去氫繪之探討。
五、研究結果:
1.得知在含有4%葡萄糖酸及0.1%殺固醇之睾固酮生產培養基培養24小時後,添加2%葡
萄糖及與殺固醇莫耳數相等之維生素C ,於30℃繼續振盪培養4 天,則可獲得睾因酮
之最高產量(0.93mmole/L)。
2.利用含4%葡萄糖酸及0.1%殺固醇之睾固酮生產培養基,於2.5-L 小型 酵槽中,培
養24小時後,添加2%葡萄糖及與殺固醇莫耳數相等之維生素C ,繼續培養至144 小時
,可獲得睾固酮最高產量0.55mmole/L。 若以含0.1%殺固醇之睾固酮生產培養基及攪
拌速率提高為450rpm之條件下,培養24小時後,再調低為300rpm,同時添加4%葡萄糖
及與殺固醇莫耳數相等之維生素C ,則在144 小時後,可獲得睾固酮之最高產量0.65
mmole/L。
3.Mycobacterium sp.NRRL 3805中確含有β- 羥基類固醇去氫 ,每克菌體濕重含0.
6 單位酵素活性,此酵素對AD轉換成睾固酮活性,在pH 6.0時活性最高,但隨著pH值
升高而降低。
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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